HE染色組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍:將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液***吸取已經預先配制好的蘇木素染色液,每個組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化,使細胞核中結合過多的染液和細胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇...
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,促進伊紅與胞漿蛋白質結合,其本身不參與染色的反應。當蘇木素染色效能極高,很短時間就導致核漿共染時,可適當地添加冰醋酸(一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現在有商用的HE染色液賣,但是質量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產生氧化膜和結晶,這也是提示更換蘇木素的標志之一)。骨組織HE染色的操作流程。推...
HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進行常規切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯...
HE染色標本一般是針對石蠟標本,脂滴和石蠟都是的有機物, 都具有非極,脂滴應該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。 H:Hematoxylin,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。 伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。南京英瀚斯生物HE染色中固定液如何配置。新疆推薦的HE染色報告HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先...
HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結構,使組織與色素分離而褪色。經蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木精染料和細胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關鍵的一步。返藍作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色,在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,...
HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證。2)切片經烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太小;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,導致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進去,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳(偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時...