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廣州RIP免疫沉淀磁珠多少錢

來源: 發布時間:2024-08-02

免疫沉淀(IP)實驗中抗體的選擇非常關鍵,因為抗體的特異性和親和力直接影響到實驗的成功與否。
1. 特異性:抗體應當對目標蛋白具有高度的特異性,以避免與其他蛋白發生非特異性結合,導致假陽性結果。
2. 親和力:抗體對目標蛋白的親和力要足夠高,以確保在免疫沉淀過程中能夠有效地捕獲目標蛋白。
3. 抗體類型:單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于IP實驗。單克隆抗體提供更高的特異性和批間一致性,而多克隆抗體可能提供更強的結合能力和更廣的表位覆蓋。
4. 應用驗證:選擇已經過免疫沉淀(IP)或相關應用(如Western blot, IHC)驗證的抗體,這增加了實驗成功的可能性。
5. 供應商信息:選擇信譽良好的抗體供應商,并查看供應商提供的技術數據和客戶評價,以幫助做出決策。
免疫沉淀技術的綜述。廣州RIP免疫沉淀磁珠多少錢

免疫沉淀技術RIP(RNA Immunoprecipitation,RNA免疫沉淀)是一種用于研究細胞內RNA與蛋白質相互作用的技術。RIP技術可以幫助我們了解轉錄后調控網絡的動態過程,并發現miRNA等非編碼RNA的調節靶點。
RIP技術的原理是利用針對特定RNA結合蛋白的抗體,將細胞內的RNA-蛋白質復合物沉淀下來。然后,可以通過分離純化,對這些復合物中的RNA進行檢測,如qPCR驗證或測序分析。
表觀遺傳學和RNA生物學領域對不同RNA作用和功能的關注增加。RNA-蛋白質相互作用能夠調控mRNA和非編碼RNA的功能。對RNA潛能的這一新認識帶動了新方法的發展,使研究人員能夠定位 RNA-蛋白質相互作用。
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RNA免疫沉淀技術(RIP)是一種研究RNA與蛋白質相互作用的重要方法,其應用領域主要包括:
1. 轉錄后調控研究:RIP技術可以幫助研究者了解RNA在轉錄后水平如何被調控。
2. 表觀遺傳調控:RIP技術用于研究RNA結合蛋白(RBPs)在表觀遺傳調控中的作用。
3. 非編碼RNA功能研究:RIP技術可以用來研究長非編碼RNA(lncRNA)、miRNA和其他小RNA的種類,以及它們如何與蛋白質相互作用來調控基因表達。
4. RNA病毒研究:RIP技術也可用于研究RNA病毒與其宿主細胞內蛋白質的相互作用,進而了解病毒復制和致病機制。
5. RNA修飾和甲基化研究:RIP技術結合其他技術如m5C-RIP-seq,可用于研究RNA甲基化修飾及其在病理過程中的作用。
6. RNA定位和穩定性:通過RIP技術,研究者可以探索特定RNA在細胞內的定位以及它們如何被穩定或降解。
7. RNA-蛋白質復合物的鑒定:RIP技術可以用來鑒定與特定RNA結合的蛋白質,從而揭示RNA-蛋白質復合物的組成。
8. 疾病相關RNA研究:RIP技術在疾病相關RNA的研究中也有應用。

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的結合蛋白,進行小規模的蛋白質親和純化的實驗。更確切地說,IP是采用固定在微珠支持物(一般是瓊脂糖樹脂)上的特定抗體,從復雜的混合物中,純化單一抗原的實驗。固定化蛋白質復合物的組裝既可以分步進行,也可以一步完成。

常見的加樣順序:抗體和樣本(如細胞裂解物)一起孵育,然后加入親和微珠,用于捕獲抗體-抗原復合物。也可以將抗體和微珠(通過抗體結合蛋白,如蛋白A、G或A/G等,直接或間接結合抗體)先進行孵育,然后再加入含有抗原的樣本。當抗原、抗體和固相支持物產生結合以后,充分洗滌微珠,再采用適當的洗脫緩沖液從支持物上洗脫抗原。
免疫沉淀技術的實驗設計。

免疫沉淀IP實驗中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實驗情況。
瓊脂糖珠海綿狀的結構  (直徑 50-150 μm)  可以結合抗體  (繼而結合靶蛋白) ,它能夠直接高效、快速結合抗體,而不需借助特殊的專業設備。瓊脂糖珠呈多孔結構,這使得它們擁有更大的表面積可與蛋白質相互接觸,具有更高的結合載量。
與瓊脂糖珠不同,磁珠是固體,抗體的結合限于磁珠的表面。磁珠 (直徑 1-4 μm) 明顯小于瓊脂糖珠 ,盡管磁珠沒有多孔中心增加結合能力,但每體積的磁珠數量比瓊脂糖珠多,使磁珠擁有足夠的抗體結合表面積滿足高容量的抗體結合。
簡而言之,瓊脂糖珠的結合能力較強,而磁珠在得率,可重復性以及自動化方面有明顯的優勢。
免疫沉淀技術ChIP的應用有哪些?上海ChIP免疫沉淀磁珠應用

免疫沉淀技術RIP的原理是什么?廣州RIP免疫沉淀磁珠多少錢

免疫沉淀(RIP)實驗中抗體的選擇非常關鍵,因為抗體的特異性和親和力直接影響到實驗的成功與否。
1. 特異性:抗體應當對目標蛋白具有高度的特異性,以避免與其他蛋白發生非特異性結合,導致假陽性結果。
2. 親和力:抗體對目標蛋白的親和力要足夠高,以確保在免疫沉淀過程中能夠有效地捕獲目標蛋白。
3. 抗體類型:單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于IP實驗。單克隆抗體提供更高的特異性和批間一致性,而多克隆抗體可能提供更強的結合能力和更廣的表位覆蓋。
4. 應用驗證:選擇已經過免疫沉淀(RIP)或相關應用(如Western blot, IHC)驗證的抗體,這增加了實驗成功的可能性。
5. 供應商信息:選擇信譽良好的抗體供應商,并查看供應商提供的技術數據和客戶評價,以幫助做出決策。
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