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來源: 發布時間:2023-11-15

糖原染色:細胞內含1,2-乙二醇基的多糖類經過碘酸氧化后產生醛基,與特殊染液作用,使無色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質之中。紅色的深淺與細胞中起反應的1,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細胞與李—斯細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,而后者反應為陰性或弱性。正常值正常情況下,紅細胞系統的原、幼紅細胞和成熟紅細胞;粒細胞系統的原粒細胞、原單核細胞和大多數淋巴細胞為陰性反應。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。天津正規糖原染色試劑盒廠家直銷

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糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應,染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質量和環境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環境溫度高,染色時間也應適當縮短,反之則需適當延長反應時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經消化處理的切片染色陰性,不經消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現配現用,用過一次即應廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。北京哪家生產糖原染色試劑盒量大從優植物材料在選擇時須盡可能不損傷植物體或所需要的部分。

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染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當穩定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物,其反應產物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應用于基因調控的研究中。根據GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學法。

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內24h。應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。

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特殊染色化學試劑的選擇:化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑,特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質量染液的前提和關鍵,特別對于染液中的關鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時,所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質量不合格,則會導致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純為主。可以觀察腎小球基底膜、結腸杯狀細胞中性黏液物質、阿米巴滋養體和霉菌的著色。江西哪家生產糖原染色試劑盒進貨價

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染色的一般原則:1.熒光素產品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細胞儀只可檢測單細胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細胞懸液,細胞數量不應低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養細胞。如果是貼壁細胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。天津正規糖原染色試劑盒廠家直銷

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