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除了讓細(xì)胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng)。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。蘇州君欣生物科技有限公司一種被稱(chēng)作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴。石家莊鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)
要準(zhǔn)備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,無(wú)齒鑷1把,200ml燒杯1個(gè),培養(yǎng)皿1個(gè),帶蓋廣口瓶1個(gè),離心管、小瓶數(shù)個(gè),滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過(guò)濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱(chēng)尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時(shí),離心。吸取其上清,分裝至小瓶,4℃保存。上述制備過(guò)程均在無(wú)菌條件下完成。合肥鼠尾膠原服務(wù)電話(huà)可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線(xiàn)下過(guò)夜消毒。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗。
鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值)。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。青島鼠尾膠原報(bào)價(jià)
將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。石家莊鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)
膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型,但為常見(jiàn)的為I、II、III型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。劃重點(diǎn):任何動(dòng)物的膠原都有許多共性,I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白。于是,動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明:一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書(shū)中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類(lèi)膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),石家莊鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)