外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢，表面由脂質和蛋白質組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性，可以穩定存在于血液中，納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，使得其作為藥物載體的應用受到限制。外泌體提取：使用抗體包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體。上海正規外泌體提取試劑平均價格

外泌體提取：1、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據外泌體的大小，從蛋白質和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體，也有設計成微柱多孔硅纖毛結構以分離40-100nm外泌體：不過，該方法由于過濾膜的粘附，可能會損失外泌體，并且過濾時的壓力和剪切力，可能會使外泌體變形受損。2、基于聚合物的沉淀技術。基于聚合物的沉淀技術通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。用這種聚合物沉淀具有許多優點，包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。目前大多數快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法。然而基于聚合物的沉淀方法可能會同時分離非囊泡污染物（包括脂蛋白）而且，聚合物材料的混雜可能會影響下游分析。徐州外泌體提取試劑廠家人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到質疑；此外，重復離心操作還有可能對囊泡造成損害，從而降低其質量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層，是一種區帶分離法。通過密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時。

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結構和茶托狀形態，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中外泌體的特殊結構和功能，使得它具有潛在的應用價值，可以作為診斷多種疾病的生物指標。

外泌體可通過流式、WB（檢測指標有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測，普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止，仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。外泌體是細胞間進行物質運輸和信息交流的重要工具，可以通過調節免疫功能促進一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉移。與細菌傳染，幫助細菌逃避免疫關系很大，并與心血管疾病，老年癡呆等疾病具有密切關系外泌體提取：高速離心以消除更大的囊泡。石家莊正規外泌體提取試劑廠家推薦

在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程，與多種疾病的發生和進程密切相關。上海正規外泌體提取試劑平均價格

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