ThermoFisherQuantStudio3D是另一個經典的芯片式數字PCR平臺，其基本的檢測流程是：將反應液加入到涂布器中，通過涂布器將反應液均勻涂布在有20000個微孔的芯片上，將芯片放在PCR儀上擴增，將芯片放入讀取儀中采取拍照的方式讀取熒光信號。操作較為復雜，整個過程在封閉的芯片中進行，污染的風險較低。STILLANaica是一個較新的數字PCR平臺，基本的檢測流程是：將反應液加入芯片，將芯片放入微滴生成擴增系統，生成30,000個微滴單層平鋪于芯片中，PCR擴增在芯片上完成。然后將擴增后的芯片轉移至微滴閱讀分析系統，采取拍照的方式讀取熒光信號。由于整個過程在封閉的芯片中進行，污染的風險較低。影響dPCR定量結果的因素：儀器采用的分散方式與數量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。上海進口數字PCR市場前景

Drop-off實驗包括兩個針對相同擴增子的TaqMan探針：與野生型序列互補而與突變位點不發生互補的Drop-off探針和與突變型和野生型基因都互補的Reference探針（如圖1A）。在野生型等位基因的存在下，Drop-off探針和Reference探針都將與目標雜交，產生雙重陽性信號（如圖1B，藍色群）。相反，如果存在突變的等位基因，即使一個核苷酸的突變也會阻止Drop-off探針與之雜交，因此只有Reference探針對目標基因進行退火，從而得到一個陽性信號。上海進口數字PCR市場前景通過不同cluster的位置進行突變位點的判斷時存在誤判的現象。

PCR（PolymeraseChainReaction）技術，即聚合酶連反應，是一種擴大和復制目的片段DNA的技術，其發現對于生命科學的發展具有重要的意義。而3D數字PCR到底是什么鬼？它其實是出現的一款PCR儀，其具有對目的DNA分子做出定量的優點，進而提供的準確性、靈敏度。應用該技術，實現對DNA進行精確定量，精確度可通過復制次數實現。通過準確性的進行定量檢測基因，有助于臨床上在、病毒等疾病作參考。同時，其具有高通量，檢測速度快，成本相對低等優點，為后期精細奠定基礎。

相比于cPCR技術和第二代qPCR技術，dPCR技術具有定量，可溯源至SI國際單位制摩爾；基質成分干擾較小[51]；靈敏度高；對抑制劑的敏感性較低；適合多重轉基因檢測[52.53]，可提高分析效率；實驗條件優化簡單[54]對實驗條件優化的要求較低，適合多重基因檢測等優勢，可為轉基因農作物提供準確的量值保證，目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統加工工藝的改進以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應用到更多的檢測中。20世紀末，Bert Vogelstein等提出數字PCR的概念。

PCR常使用目標序列的拷貝數或某一給定樣品中轉基因的百分比來體現方法靈敏度。由于qPCR和dPCR實驗過程所用試劑的兼容性較好，在使用dPCR進行轉基因檢測時，通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術對相同樣品檢測時，兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關注的問題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765（12板，每板765個微單元）芯片數字PCR分析儀測定標準物質ERM-AD413檢測轉基因玉米MON810。該小組應用dPCR技術評估在qPCR定義下的靈敏度數值，在拷貝數200-700之間，dPCR與qPCR的測量結果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比，dPCR在低于拷貝數200時有被低估的風險，在高于拷貝數1000時有被高估的風險。dPCR在同一陣列上同時測量轉基因和內源性靶點時，需要稀釋內源性靶點和轉基因靶點在合理拷貝數范圍內以保證dPCR測量結果的準確性。數字PCR的**原理：有限稀釋、終點PCR和泊松分布。蘇州臻準數字PCR性能特點

在患者術后復發檢測中，數字PCR評估出的ctDNA陽性，可以早于影像學數月提前揭示出患者復發。上海進口數字PCR市場前景

對于檢測需要高靈敏度以及技術確認的情況下，數字PCR技術也可以發揮重要作用。技術數據表明，數字PCR技術對的比較低檢測下限可到2copies/ml，比qPCR靈敏度提升了100倍。經測試，數字PCR在檢測和診斷的某些方面優于金標準qPCR，尤其是在低病毒載量樣本中，相比起qPCR，數字PCR特異性、靈敏度、重現性和檢測限受影響更小。因此，未來預計數字PCR技術也將在類疾病中得到更加廣的應用。數字PCR的應用甚廣，除了可應用于進行突變的檢測以外，也可運用于基因擴增的檢測。通過數字PCR技術可建立多重熒光體系，用于同時檢測比如非小細胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴增。有研究報道，使用數字PCR技術對436例非小細胞肺樣品進行檢測，并挑選樣本驗證了數字PCR與RNA fish的檢測一致性。結果表明，該數字PCR技術在保證了基因擴增檢測準確性的同時，還節約了檢測時間。上海進口數字PCR市場前景

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