二項式分布是一個離散概率分布,它給出了m次試驗中k次成功的可能性,每次試驗的概率為p,例如當擲骰子時,二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數字PCR的情況中,投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區中,當目標落在選定的分區中時,就是成功。如果有n個分區,并且分區過程是完全隨機的,則目標出現在所選分區中的概率為1/n。該試驗重復m次,樣品中的每個分子一次。更多關于PCR的相關信息,歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。數字PCR是直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的定量。美國銳訊數字PCR價格
20世紀末,Vogelstein等提出數字PCR(digitalPCR,dPCR)的概念,通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應單元,每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板),在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增,擴增結束后對各個反應單元的熒光信號進行統計學分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應,擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。蘇州銳訊數字PCR生命科學用品dPCR的測量結果通常表示為含量,即拷貝數轉基因質量百分比,而QPCR結果通常表示為拷貝數的質量分數。
數字PCR系統的分散方式決定了分散數量,其結果基于統計的方法進行定量,增加反應單元數量(統計樣本量),可以增加其檢測的容量和動態檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態范圍,同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差,達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結果的因素包括:儀器采用的分散方式與數量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。分散方式與數量由數字PCR系統決定,分散體積和結果表達方式需要實驗人員在實驗過程中優化得到。
dPCR的測量結果通常表示為含量,即拷貝數值或轉基因質量百分比,而QPCR結果通常表示為拷貝數的質量分數。目前市場上可購買到大多數轉基因標準物質,以qPCR定值的標準物質是以拷貝數(單倍體基因組當量)的質量分數來表示特性量;以dPCR定值的標準物質直接采用拷貝數比例來表示特性量。不同方法使用不同的表示方式,會造成測量結果不可比。因此質量分數、拷貝數和拷貝數比例之間的關系需要轉化,才能得到單位一致,數值可比的數據。EU聯合研究中心建議使用轉換因子從拷貝數換算到質量分數。拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。
在精細診療領域,患者外周血中的循環DNA(ctDNA),在的早期篩查,圍術期監測,藥物療效評估,預后等方面具有重要的臨床應用價值。在肺液體活檢領域,EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實現精細檢測顯得尤為重要。研究表明,相較于熒光定量PCR,數字PCR對于血液ctDNA的檢測靈敏度更高(0.01%),EGFR突變的陽性檢出率也更高。在患者術后復發檢測中,數字PCR評估出的ctDNA陽性,可以早于影像學數月提前揭示出患者復發。因此,該項技術在肺精細診療中具有重要的作用。通過創新技術微流控芯片,讓數字PCR單反應耗材價格進入個位數,實現了新的進步,也降低開發難度。廣州全自動數字PCR品牌
數字PCR作為研發階段的驗證方案之一。美國銳訊數字PCR價格
全自動樣本制備系統DMX-1000配備氣流發生裝置和氣壓控制裝置,能夠實現高精度壓力控制,結合專利產品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術,DMX-1000可以在70秒內快速、穩定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數量可達2萬-60萬個,粒徑范圍30-120μm,性能穩定。除此之外,銳訊還提供微流控芯片的定制服務,以滿足不同的液滴數目和尺寸要求。平板式快速擴增儀TC-1000,不再使用傳統的96孔板,而是特制的液滴擴增芯片;不再是傳統的“燒開水”加熱模式,代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進之下,TC-1000完成40個PCR循環只需約45分鐘(TC-2.0升級版更是把時間縮短到了25分鐘!),大幅縮短了等待時間,提升了實驗進度。這對實驗人員而言,無疑是莫大的福利——高效完成工作,不加班——愛工作,也愛生活。美國銳訊數字PCR價格
廣州雙螺旋科學儀器有限公司是以提供數字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀為主的有限責任公司(自然),雙螺旋科學儀器是我國精細化學品技術的研究和標準制定的重要參與者和貢獻者。雙螺旋科學儀器以數字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀為主業,服務于精細化學品等領域,為全國客戶提供先進數字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀。多年來,已經為我國精細化學品行業生產、經濟等的發展做出了重要貢獻。