多光譜成像流式細胞術 (MIFC) 每秒可測量多達 5000 個來自流體懸浮液的粒子,并且可以同時捕獲多達 12 張每個單個粒子的圖像,用于明場和不同的光譜范圍,放大倍率高達 60 倍。MIFC 的高通量具有提高環境監測數量和準確性的巨大潛力,例如目前依賴手動顯微方法的植物-傳粉媒介相互作用、化石樣本、空氣、水或食品質量。當 MIFC 與深度學習計算技術相結合時,粒子和細胞的自動識別也是可能的。此外,各種熒光染料可用于染色細胞的特定部位以突出生理和化學特征,包括:花粉或藻類的活力、單個花粉的過敏原含量、細胞的表面化學成分(碳水化合物涂層)、DNA-或酶-活性染色。在這里,我們概述了 MIFC 在各種研究領域和焦點生物的環境研究中的巨大潛力。此外,我們還提供比較好實踐建議。花粉或藻類的活力、單個花粉的過敏原含量、細胞的表面化學成分(碳水化合物涂層)、DNA 或酶活性染色。在這里,我們概述了 MIFC 在各種研究領域和焦點生物的環境研究中的巨大潛力。此外,我們還提供比較好實踐建議。花粉或藻類的活力、單個花粉的過敏原含量、細胞的表面化學成分(碳水化合物涂層)、DNA 或酶活性染色。CyFlow Analyser倍性分析儀在醫學、農業科學、育種水產養殖等應用領域提供完美解決方案。上海CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀生命科學用品
樣品的新鮮程度直接影響實驗的結果。由于次生代謝產物的影響,會導致信號峰過寬,甚至檢測不到信號峰的情況。嫩葉的選擇要選擇新鮮、完全展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位。嫩葉的檢測效果明顯好于較老的葉片。倍性檢測首先需要裂解液裂解細胞獲得游離細胞核,然后用 DAPI 染液將細胞核染色體上的 A-T 堿基染色,再用倍性分析儀儀器檢測細胞核里被染色的 A-T 堿基發出的熒光強度。比如二倍體的熒光強度是 100(橫坐標),那么四倍體的熒光強度就是 200(橫坐標),如下圖所示,用 DAPI 染色法檢測蠶豆的倍性。結果的縱坐標是細胞數量的顯示,通常來說,信號峰高說明信號比較好,雜質少。進口CyFlow系列倍性分析儀Ploidy Analyser倍性分析儀采用Partec*染色技術。
菌類的基因組大小信息很少,只有不到 2000 個物種的信息可用。到目前為止,大多數記錄都是使用靜態的、基于顯微鏡的細胞計數方法獲得的,或者來自基因組測序項目。流式細胞術現在被認為是獲得基因組大小測量的較先進方法,并且可以使用適當的方法和 DNA 標準,從而能夠以快速、可靠和廉價的方式分析大多數基因組大小范圍。平均菌類基因組大小為 60 Mbp,但大小因系統發育而異,從 2.2到 3706 Mbp 。在幾個菌類進化枝中,基因組大小的擴張似乎伴隨著植物共生或植物寄生的進化,與植物相互作用的菌類似乎比腐生菌和與動物相互作用的菌類具有更大的基因組。雖然用于核 DNA 定量的流式細胞術在植物科學中常規用于基因組大小和倍性研究,但其在菌類生物學中的使用仍然很少。此處描述了適當的標準、方法和比較好實踐,旨在促進流式細胞術在菌類基因組大小測量中更普遍和更多的應用。
免疫表型是流式細胞術中比較常用的應用。它利用流式細胞術的獨特能力來同時分析混合細胞群的多個參數。在簡單的形式中,免疫表型實驗由用熒光染料偶聯抗體染色的細胞組成,這些抗體靶向細胞表面的抗原。這些抗原中的大多數由人類白細胞分化研討會給出“分化簇”編號或CD編號,以便使用通用命名法來定義針對特定細胞抗原的單克隆抗體。例如,CD3是用于定義存在于所有T細胞上的T細胞共受體,也就是T淋巴細胞,在T淋巴細胞分類中,根據表面標志和分化抗原的不同分為CD4+T細胞和CD8+T細胞。使用流式細胞術和成像流式細胞術分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報告基因。
擬南芥是一種生長迅速的小型植物,可進行范圍廣的核內復制,在不發生有絲分裂的情況下進行基因組擴增。該物種含有有花植物中較小的基因組,約157Mb,C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測定基因組大小的內參,并且可以用于儀器線性度的質量控制。用于流式實驗的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標準手術刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中,過濾含植物細胞核的勻漿以去除大的碎片,用DNA特異性熒光染料進行標記,然后在流式細胞儀上采集數據,根據每個細胞核的熒光強度來計算DNA含量。通過與已知標準品比較,可以用熒光強度換算出DNA含量的相對值。擬南芥通常用作內參,只需將內參樣品和未知樣品的細胞核同時進行分離、染色和分析即可。流式細胞術的檢測特點:單細胞水平分析。進口CyFlow系列倍性分析儀
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