為何樣本都需求稀釋呢?在試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋?有兩個(gè)原因:1.比賽按捺對(duì)比明顯,應(yīng)稀釋比賽物;2.以下降非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。血清稀釋用一般的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降本底,當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽,血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確認(rèn),但也不必一點(diǎn)點(diǎn),你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可,挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的中陰性孔OD在1.0,這么作出來的曲線對(duì)比靈敏。試劑盒檢測(cè)范圍和靈敏度不同。四川生化試劑銷售價(jià)格
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。四川生化試劑銷售價(jià)格試劑盒不收取組織樣品處理費(fèi),價(jià)格實(shí)惠。
試劑盒手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法:標(biāo)本為血清:盡可能將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,取血后必須立即顛倒取血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2)加樣后及時(shí)放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
試劑盒因?yàn)榭乖⒖贵w的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每參與一種試劑孵育后,可通過洗刷除掉剩余的游離反應(yīng)物,然后保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。使用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次參與,再與HRP符號(hào)的抗體結(jié)合,構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,通過完全洗刷后加底物TMB顯色。試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成的黃色。試劑盒避免反復(fù)冷凍,盡可能的不要使用溶血或高的血脂血。
試劑盒要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排裝置各一支。吸取不同的液體后,要更換裝置頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。用裝置吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的裝置去吸,減少誤差。將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免裝置頭和孔內(nèi)液體接觸,可使裝置頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。仔細(xì)閱讀試劑盒說明書,熟悉整個(gè)流程。四川生化試劑銷售價(jià)格
試劑盒酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。四川生化試劑銷售價(jià)格
試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。試劑盒特點(diǎn):高效、靈敏、特異的抗體;穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。四川生化試劑銷售價(jià)格