酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調節花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態調控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調節提供了新見解。酵母雙雜交文庫構建實驗流程。安徽運用酵母文庫
酵母單雜交篩選技術:關于HIV想必大家都不陌生,***HIV病毒后潛伏周期長,且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV,不讓其發病就要從2方面入手:要么消除潛伏***的細胞,要么防止潛伏原病毒的細胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉錄。但是關于HIV在人細胞中的復制、轉錄和潛伏期調控的分子網絡仍不完全確定,所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個問題,波士頓大學的研究者,使用酵母單雜交篩選技術,以HIV-1,HIV-2的LTR(啟動子和增強子)為誘餌,篩選了人的轉錄因子文庫(包含1086個人的轉錄因子),**終繪制了調節HIV-1和HIV-2的轉錄網絡圖譜,結果發表在2021年的PNAS雜志上。河南運用酵母文庫報價主要用于擴繁酵母備篩選文庫,同時比較大限度保持初始酵母文庫多樣性。
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導蘋果黃酮醇積累的關鍵性調控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結果顯示篩選出的蛋白質主要參與光合作用調控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應、***信號轉導、木質素生物合成、果實成熟發育等過程,以及一些功能未知的蛋白質。其中, MdSCL8轉錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報導與黃酮的合成有關,引起了研究者的注意。進一步通過Y1H assay驗證確認了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作(圖2A)。通過雙熒光素酶實驗和GUS檢測,發現MdSCL8可以負向調控MdFLS1啟動子活性(圖2B-D)。
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達MdJAZ1/MdJAZ1,結果顯示過表達MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補成像實驗結果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復 MdTRB1 與 MdMYB9 的結合。對于 MdTRB1 在 JA 介導的花青素和原花青素積累中的作用機制,本研究建立了一個新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強了 MdMYB9 對下游基因的轉錄***活性,進而正向調節了 JA 介導的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續過程。酵母雜交案例專業的碩博團隊。
本研究利用水稻轉錄因子文庫篩選,繪制了水稻轉錄因子和菌根共生相關基因之間的調控網絡。該網絡受到保守的磷感應途徑統一控制,以磷酸鹽饑餓響應因子(PHR)為中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通過 P1BS 順式作用元件調控菌根共生相關基因表達。高磷條件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導的對菌根共生相關基因表達的調控,進而抑制菌根共生。過表達 OsPHR2 可以部分拮抗磷介導的對菌根共生的抑制作用。本研究發現,植物直接營養吸收和通過菌根共生的間接營養吸收,都受到相同的磷信號網絡統一調控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。關于酵母雜交文庫構建及篩選你需要知道這些。河南運用酵母文庫報價
酵母文庫雙雜交技術及應用。安徽運用酵母文庫
酵母文庫實驗由歐易生物協助完成。2021年3月,上海師范大學楊洪全教授為通訊作者,在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文,報道了擬南芥光形態建成調控的分子機制。上海師范大學茅志磊博士為***作者,文章中酵母文庫實驗由歐易生物協助完成。太陽光不僅為植物的光合作用提供能量來源,也是調節許多植物發育過程的關鍵環境信號。植物可以通過多種光受體監測和響應不同波長、方向和強度的光,其中**早發現的是藍光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個,其中 CRY1 主要參與調控光形態建成,CRY2 主要參與光周期開花調控。安徽運用酵母文庫
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