酵母雙雜交實驗表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(圖 D-E)。為進一步研究在年齡信號調控中的作用機制,分別構建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養-生殖時相轉換(圖A),證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現出早開花和花序結構過早終止,表明PtMADS11在開花調節和花序內分生組織命運起到調控作用。在擬南芥中利用年齡調控通路不同節點關鍵基因突變體進行功能互補實驗,結果顯示過表達PtDAL1可以恢復由于過表達miR156導致的開花延遲,但ft缺失會導致PtDAL1失活,PtDAL1過表達也不能恢復soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復由過表達miR156或ft缺失導致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調控不依賴于miR156或FT。酵母雙雜交文庫構建實驗流程。陜西宣傳酵母文庫做什么
酵母文庫:2021年11月,山東農業大學園藝科學與工程學院張振魯團隊在MolecularPlantPathology(IF:5.663)發表了題為“Nitrate-inducibleMdBT2actsasarestrictionfactortolimitapplenecroticmosaicvirusgenomereplicationinMalusdomestica”的研究論文,報道了MdBT2蛋白在抑制病毒ApNMV基因組RNA復制中的作用。文章中所用酵母文庫為歐易生物構建。ApNMV與ApMV相似,含有3種正義單鏈基因組RNAs:RNA1(編碼1a蛋白,后面你會經常看到它,對病毒復制至關重要),RNA2(編碼RNA聚合酶)和RNA3(編碼MP),以及在3種RNA中排名第4的RNA4(編碼CP)。當然蘋果如何抵抗ApNMV的研究機制就更少了。陜西宣傳酵母文庫做什么酵母文庫質粒使用指南酵母菌的介紹 。
酵母文庫篩選:為了系統地揭示調控叢枝菌根共生的轉錄因子,研究者以51個水稻基因的啟動子為誘餌,利用包含1570個水稻全長轉錄因子的文庫進行了酵母單雜交篩選。這51個基因主要是已報道的參與或調節菌根共生的基因。文庫篩選發現了一個由266個轉錄因子和47個啟動子高度連接的網絡,稱之為"叢枝菌根共生酵母單雜交網絡(YAM)"。平均每個啟動子可以和4個轉錄因子互作。266個轉錄因子分屬至少11個轉錄因子家族。72%(192個)的YAM轉錄因子在根中存在表達(FPKM>1)。與非定殖根相比,19個YAM轉錄因子在叢枝菌根***定殖的根中表達上調。
本研究利用水稻轉錄因子文庫篩選,繪制了水稻轉錄因子和菌根共生相關基因之間的調控網絡。該網絡受到保守的磷感應途徑統一控制,以磷酸鹽饑餓響應因子(PHR)為中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通過 P1BS 順式作用元件調控菌根共生相關基因表達。高磷條件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導的對菌根共生相關基因表達的調控,進而抑制菌根共生。過表達 OsPHR2 可以部分拮抗磷介導的對菌根共生的抑制作用。本研究發現,植物直接營養吸收和通過菌根共生的間接營養吸收,都受到相同的磷信號網絡統一調控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。篩選酵母文庫選歐易生物技術可靠服務高效多年經驗。
本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復合物關鍵亞基 SWC6、ARP6 結合,共同以藍光依賴模式調控 H2A.Z 在染色質的沉積。藍光***的 CRY1 可以增強 SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結合,將 SWR1 復合物募集到 HY5 靶向位置,調控 HY5 靶基因的表達,進而影響擬南芥下胚軸的伸長據此,本研究提出擬南芥光形態建成調控的分子機制:CRY1 通過增強 SWR1 復合物活性和 HY5 介導 SWR1 復合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進 H2A.Z 染色質沉積,以調控 HY5 靶基因的表達和藍光條件下光形態建成。酵母文庫構建的目的酵母的做法。廣東發展酵母文庫做什么
酵母單雜交/雙雜交文庫構建簡述酵母雙雜交。陜西宣傳酵母文庫做什么
目前,歐易生物負責該水稻轉錄因子文庫的維護和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉錄因子篩選服務。如去年歐易生物助力中國科學院分子植物科學***創新中心的王二濤老師應用該文庫對水稻-叢枝菌根進行了深入研究,成功構建了水稻-叢枝菌轉錄調控網絡,結果發表于《Cell》封面。截至文章發表,該文庫已收錄了1683個水稻轉錄因子,隸屬于54個家族,覆蓋預測的水稻轉錄因子總量的70%。文庫中水稻轉錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數據庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個轉錄因子菌株**保存于96孔板中。陜西宣傳酵母文庫做什么
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