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上海應(yīng)用酵母文庫做什么

來源: 發(fā)布時間:2023-03-09

酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授為通訊作者,在 Plant Physiology 雜志(IF: 6.902)在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文,深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長調(diào)控分子機制。氮素是植物生長發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)之一,硝酸鹽是植物根系吸收無機氮的主要形式。除了營養(yǎng)功能,硝酸鹽還可以通過多種信號途徑來調(diào)節(jié)植物生長和發(fā)育過程。赤霉素(gibberellin,GA)是一種植物***,同樣可以調(diào)控植物生長發(fā)育過程。然而,硝酸鹽和赤霉素信號通路如何共同調(diào)節(jié)植物生長的確切分子機制仍知之甚少。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求。上海應(yīng)用酵母文庫做什么

酵母雙雜交篩選實驗:為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強抗旱性的分子機制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株河南發(fā)展酵母文庫做什么酵母文庫酵母單雜交篩庫科技研究雙文庫高校外包平臺。

酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比,擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低,而硝酸鹽處理可以進一步抑制其生長,外源施加GA可以回復(fù)其生長缺陷。在擬南芥中異源表達MdBT2可以明顯提高植株高度,而PAC處理則會抑制這種生長的促進作用。在擬南芥中異源表達MdRGL3a可以明顯抑制植株生長,而硝酸鹽處理和MdBT2過表達則會緩解這種生長抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響(圖A-D)。以上結(jié)果表明,BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長,這一機制在不同的植物中具有保守性。

酵母雙雜交文庫:本研究通過藍/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達。實驗表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調(diào)節(jié),在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用,AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結(jié)合正向調(diào)節(jié)青蒿素的積累。此外,JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用,并抑制其轉(zhuǎn)錄***活性,而在MeJA存在情況下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的轉(zhuǎn)錄***活性增加,進而促進青蒿素生物合成基因的表達。酵母雙雜交文庫結(jié)果表明,AaWRKY9有助于光和JA信號調(diào)節(jié)青蒿素的生物合成,為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調(diào)控提供了新見解。酵母文庫雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。

酵母雜交試驗:隨著分子生物學(xué)研究進入以蛋白質(zhì)組學(xué)為標(biāo)志的后基因組時代,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用已成為互作組學(xué)研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白,只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動態(tài)變化,每個物種、個體、細胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡(luò)圖,這一張張圖譜中,蘊藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式:第一種酵母雜交試驗,通過偶聯(lián)基因表達體現(xiàn)細胞內(nèi)發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標(biāo)簽分離純化復(fù)合體,然后用質(zhì)譜鑒定復(fù)合體內(nèi)部組分,識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質(zhì)。兩種高通量方法彼此互補,相互驗證。百種酵母文庫,讓您的科研不再困難!!云南應(yīng)用酵母文庫

酵母文庫篩選研究多年建庫與篩選經(jīng)驗驗證。上海應(yīng)用酵母文庫做什么

酵母文庫實驗:本研究發(fā)現(xiàn)了一個硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達所導(dǎo)致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。上海應(yīng)用酵母文庫做什么

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