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來源: 發布時間:2023-03-10

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酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達MdJAZ1/MdJAZ1,結果顯示過表達MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補成像實驗結果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復 MdTRB1 與 MdMYB9 的結合。對于 MdTRB1 在 JA 介導的花青素和原花青素積累中的作用機制,本研究建立了一個新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強了 MdMYB9 對下游基因的轉錄***活性,進而正向調節了 JA 介導的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續過程。湖北什么是酵母文庫做什么酵母雜交技術是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測的技術。

酵母文庫:近日,上海市農業科學院作物育種栽培研究所儲黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者,在Plant,Cell&Environment雜志(IF:7.228)在線發表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent,OsSCYL2,regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文,報道了水稻中一個被網格蛋白包被囊泡的一個重要組分OsSCYL2調控稻水先天免疫的分子機制。上海市農業科學院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實驗由歐易生物完成。

酵母單雜交測試:為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以OsMADS1為誘餌篩選水稻轉錄因子文庫,進行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌,進行了酵母單雜交測試。結果顯示我們的水稻轉錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統,即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質粒更簡單高效。此外,可通過降低篩選壓力處理,進行弱相互作用的檢測。酵母有那些結構及各部分的功能是什么。

通過傳統的酵母雙雜交系統,以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進行PCR擴增,并將所有的PCR產物進行純化。使用純化后的PCR產物,進行打斷后構建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數據。通過分析二代測序數據,獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網絡進行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達譜、啟動子中的順勢作用元件功能進行分析,并對DIPs進行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結果,構建針葉樹老化途徑的調控模型(圖4)。關于酵母雜交文庫構建及篩選你需要知道這些。海南發展酵母文庫報價

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酵母文庫實驗由歐易生物協助完成。2021年3月,上海師范大學楊洪全教授為通訊作者,在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文,報道了擬南芥光形態建成調控的分子機制。上海師范大學茅志磊博士為***作者,文章中酵母文庫實驗由歐易生物協助完成。太陽光不僅為植物的光合作用提供能量來源,也是調節許多植物發育過程的關鍵環境信號。植物可以通過多種光受體監測和響應不同波長、方向和強度的光,其中**早發現的是藍光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個,其中 CRY1 主要參與調控光形態建成,CRY2 主要參與光周期開花調控。湖北什么是酵母文庫做什么

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