歐易生物高級技術支持陳老師首先給大家介紹了空間轉錄組學的發展歷程、測序流程及原理。緊接著，歐易生物技術支持姚老師針對目前空間轉錄組學發表的一系列高分文章進行了方案設計的解析。姜老師給大家詳細介紹了空間轉錄組項目樣本準備、切片、貼片等實驗過程及注意事項，并帶領大家到實驗室實地觀摩了整個實驗過程，并就其中細節進行了講解。董老師針對空間轉錄組10x Space Ranger的分析原理及結果進行了詳細解析，并介紹了使用Seurat包進行數據挖掘的標準分析流程。空間轉錄組細胞通訊分析方法簡介及實操。江蘇歐易生物空間轉錄組規格

廣義上來說，目前一共有4種解析“空間性轉錄組”的策略：2.第一種是利用計算機算法，根據單細胞轉錄組數據來模擬重構組織的空間形態。例如Seurat，這是一個在單細胞數據分析中***用到的R包，我們可以利用scRNA-seq數據，加上對markegene進行原位測序的結果來重構組織的空間信息。3.第二種，激光顯微切割+二代測序（LCM+NGS）。這種技術對儀器和實驗人員的操作要求較高，而且獲取的通量也比較低，如果組織非常珍貴或者研究的內容十分精細，可以考慮這個。但是這種策略比較難被官方干運用。4.第三種策略，就是基于高分辨圖像的原位測序。**經典的是smFISH當然，這種方法的通量比較低。當然隨著技術的發現，剛發布的FISH-seq技術通過多輪雜交的方式，已經把測序通量提高到了10000+個轉錄本。5.***就是“基于空間條形碼（spatialbarcodes）的空間轉錄組技術。本文主要討論的也就是這種技術。后面主要討論的都是基于這種策略。 江蘇歐易生物空間轉錄組規格空間轉錄組學技術主要包括 MERFISH 和 seqFISH。

10x Genomics空間轉錄組技術的準確性高嗎？下圖是一個將10x Genomics空間轉錄組技術應用于小鼠海馬體研究的案例。A圖為腦組織切片的HE染色結果，從10x Genomics空間轉錄組分析結果中，可以清晰看到Tmsb4x（B圖）和Selenow（C圖）在海馬體區域高表達，和已知的研究結果一致性較高。開展10x Genomics空間轉錄組需要做哪些準備？空間轉錄組是一項十分前沿的技術，涉及到很多細節方面的準備工作，例如組織類型的選擇、前期預實驗的設計、病理區域的確認等一系列內容。而且實驗中存在很多不確定性因素，處理不慎容易導致整個項目失敗。

空間轉錄組的方法和技術有哪些？廣義上講，現有的生成空間分辨轉錄組學的方法可分為四類：用于空間重建的計算策略和組學實驗的組合，使用激光捕獲顯微切割（LCM）結合高通量進行直接測量，使用熒光物質的基于圖像的原位轉錄組學 ，以及基于寡核苷酸的空間條形碼再加上高通量。每種方法都有其優點和缺點。空間重構的計算策略：這種計算方法可以充分利用內在基因表達模式或共表達的趨勢，從單個細胞的大量轉錄組數據中重構細胞間的環境。然而，這些推論方法在某些情況下*呈現空間趨勢或特定組織的總體布局。基于LCM的方法：基于LCM的轉錄組學或基因組學成功地獲得了單個細胞的空間轉錄組，盡管其通量很低，但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復用條形碼策略可行之前，將少量細胞的數據粗略地整合到構成***的巨大背景中，可能具有一定價值。基于圖像的原位轉錄組學：基于圖像的原位轉錄組學在很大程度上增加了可檢測區域，但也存在一些問題，例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉錄本積累等復雜背景中提取單個細胞。空間條形碼加高通量：費用較高且無法在單個細胞中獲得轉錄組。Cell上發表了一篇利用空間轉錄組解析人鱗狀細胞*的文章。

人類細胞圖譜項目的主要目標之一是描述所有細胞類型的空間關系。同時基于表達特征對多種細胞類型進行空間映射，有助于研究不同細胞類型之間的相互作用。已經發展了一些策略來檢測單細胞分辨率的空間基因表達譜，如Slide-seq、seqFISH或MERFISH。為了更有效地為研究群體探索空間基因表達數據，我們構建了SpatialDB數據庫用于空間解析的轉錄組。

人類細胞圖譜項目極大地推動了單細胞水平的生命科學研究。空間轉錄組學技術的發展和空間基因表達數據的快速積累是未來的發展趨勢。我們將繼續收集新的技術和數據集來更新SpatialDB。此外，我們將整合更多的工具和數據源來分析數據. 空間轉錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數據的技術，從而解析單個組織切片中的所有mRNA。天津應用空間轉錄組

空間轉錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失。江蘇歐易生物空間轉錄組規格

空間轉錄組技術原理是什么？當組織冷凍切片附在空間轉錄組載片上時，條形碼引物結合并從組織中捕獲鄰近的mRNA。被捕獲的mRNA開始逆轉錄，得到的cDNA中包含了空間條形碼。分析Illumina測序結果中空間條形碼的序列，可以將每個mRNA轉錄的序列映射回組織切片中的起始位置。空間轉錄組的條形碼逆轉錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著，空間轉錄組使得在mRNA樣品處理和后續測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。歐易生物具有上百例空間轉錄組項目執行經驗，致力通過質量的服務，助力各位科研工作者取得新的突破。江蘇歐易生物空間轉錄組規格

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