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廣東哥廷根小型豬原代肝細胞系

來源: 發布時間:2022-09-04

結合國內外小鼠原代肝細胞分離培養的方法并加以改良,成功獲得了產量高、活率高、純度高的原代肝細胞,在此基礎上采用不同濃度的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1)誘導貼壁的原代肝細胞,成功構建了肝脂肪變性細胞模型,并且能夠很好地模擬體內肝實質細胞脂質累積的現象。由于肝脂肪變性細胞模型還存在一定的局限性,如不能充分模擬肝臟局部微環境對NAFLD發病過程的影響,因此還需將細胞模型與動物模型相互聯系起來,使兩種模型相互補充,取長補短,為進一步研究NAFLD的發病機制及藥物治療奠定基礎。原代肝細胞的用途?歡迎致電上海中喬新舟!廣東哥廷根小型豬原代肝細胞系

    隨著人們飲食結構和生活方式的改變,脂肪肝的發病率也呈逐年升高趨勢。臨床上根據飲酒與否,將其分為非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)和酒精性脂肪性肝病(alcoholicfattyliverdisease,AFLD)2種類型。NAFLD是指除酒精和其他已知致肝損傷因素外,以胰島素抵抗和肝細胞脂肪變性為主要特征的臨床病理綜合征。NAFLD涵蓋從單純性脂肪變性/非酒精性脂肪肝到非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化和肝細胞的過程[1-3]。據有關資料顯示,NAFLD在全世界范圍內患病率是25%左右[4],在亞洲地區的發病率甚至高達[5],且呈逐年上升趨勢。在中國,NAFLD患病人數增長迅速且呈低齡化發病趨勢,發病率約為,已成為只次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病[6-7],嚴重威脅人類健康。 江西人體原代肝細胞一般多少錢選擇原代肝細胞應該注意什么?上海中喬新舟告訴您。

細胞培養方法:1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

    原代肝細胞體外培養48h后,參照文獻[20-21]報道的方法誘導脂肪變性細胞模型。設置不同濃度(0~)的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1),FFA混合物與含10%胎牛血清的DMEM高糖培養基充分混勻后按濃度順序依次加入六孔板中,置于37℃、含5%CO2的細胞培養箱中培養,24h后油紅O染色,觀察細胞內脂滴沉積情況,并采用全自動生化分析儀檢測肝細胞內TG含量。油紅O染色步驟:棄去六孔板中的培養基,PBS緩沖液清洗1~2次,加入油紅O固定液固定20~30min;棄去固定液,加入新鮮配制的油紅O染液染色10~20min;60%的異丙醇浸洗1~2min,三蒸水清洗2~3次直至無多余染液;加入蘇木素染液染色1~2min,油紅OBuffer清洗1min,晾干,倒置顯微鏡下觀察。細胞內TG測定步驟:棄去六孔板中的培養基,PBS緩沖液清洗1次,按每孔細胞數量加入150~250μL的RIPA裂解液,刮刀刮取細胞,冰上裂解30min,4℃,13000r/min,離心10min,取上清,全自動生化分析儀檢測肝細胞內TG含量。 原代肝細胞如何選擇?上海中喬新舟告訴您。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!

肝臟是人體“的”代謝,與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關。肝細胞在肝臟參與的各種代謝過程中發揮了主要作用。肝細胞是實質細胞,在肝臟中的比例多;此外實質細胞還包括少量的膽管內皮細胞。而非實質細胞則包括星狀細胞,巨噬細胞,NK細胞,成纖維細胞等,只占整個肝臟細胞的20%左右。原代肝細胞的優點:①原代肝細胞由于離體時間短,因此其能夠保持在體內的生物學特性,是更接近體內環境的研究模型。②原代肝細胞能夠避免體內實驗時肝臟其他細胞對肝細胞的影響,從而得出更加準確的研究結果。③原代細胞相比體內實驗具有更好的可控性。 上海中喬新舟告訴您 原代肝細胞的選擇方法。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!海南雞胚原代肝細胞特點

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