qPCR第三方檢測方法的分析驗證有哪些內容？效率不僅是 PCR 效率，還包含反轉錄（Reverse transcription，RT）的效率。RT 效率是指 RNA 合成 cDNA 的效率，如果 1,000 個 RNA 分子變成 1,000 個 cDNA 分子，效率就是 100% ，實際上很多 RT 酶的效率對于不同濃度的 RNA 樣本存在差異，這樣 cDNA 擴增后的結果并不能真實反映樣品中 RNA 的水平。PCR 效率是指 DNA 在擴增的每個循環中復制的效率，每個循環增加 2 倍，其效率就是 100% ，這也和所選試劑、引物、模板質量密切相關。梯度稀釋實驗得到的標準曲線可直觀地顯示各濃度理論值和測得的 Cq 值的相關性，其中 R2 值表示各個數據點是否正好落在標準曲線上，當 R2 < 0.98 時，表明數據偏差較大。成都瑞普信提供第三方WB基礎實驗檢測。成都流式分析第三方檢測中心

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GSDME全長蛋白在切割前是沒有活性的，N端和C端結構域之間的分子內相互作用調控自抑制。caspase-3可以將全長GSDME，剪切成有活性的N端（包含1-270a段的GSDME-N）和C端（GSDME-C）。如果需檢測到N端或者C端的GSDME片段，細胞通常需要誘導處理。在檢測GSDME全長時需注意，其表達水平因樣品類型（組織和細胞）而異，可能在部分組織和細胞株系表達，其表達水平也存在差異，因此需要對樣品處理和WB實驗進行一些優化。建議設置陽性和陰性對照。并且組織樣本成分更復雜，在WB實驗時可能出現多條條帶現象。成都流式分析第三方檢測中心

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