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    WB檢測蛋白實(shí)驗(yàn)報(bào)告范本-成都瑞普信生物技術(shù)有限公司。時(shí)間就是金錢，效率就是生命唯有惜時(shí)才能成功，唯有努力方可成就。實(shí)驗(yàn)報(bào)告書實(shí)驗(yàn)報(bào)告書項(xiàng)目名稱項(xiàng)目名稱Westernblotting檢測組織中蛋白表達(dá)檢測組織中蛋白表達(dá)客戶姓名客戶姓名合同號(hào)合同號(hào)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人項(xiàng)目負(fù)責(zé)人一、一、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑實(shí)驗(yàn)儀器與試劑時(shí)間就是金錢，效率就是生命唯有惜時(shí)才能成功，唯有努力方可成就表格一實(shí)驗(yàn)儀器表格一實(shí)驗(yàn)儀器儀器儀器廠家廠家型號(hào)型號(hào)小型垂直電泳槽Biorad164-8001轉(zhuǎn)印槽BioradTrans-Blot脫色搖床常州澳華TY-80B電泳儀上海天能EPS-200低溫高速離心機(jī)64RBECKMAN酶標(biāo)儀ThermoScientificMultiskanSpectrum表格二試劑表格二試劑試劑試劑廠家廠家RIPA裂解液碧云天PMSFAmrescoBCA蛋白定量試劑盒ThermoTrisAmresco甘氨酸Amresco鹽酸國藥集團(tuán)甲醇國藥集團(tuán)Tween20國藥集團(tuán)SDS國藥集團(tuán)TEMEDSigmaBSASigmaPVDF膜MilliporeHRP標(biāo)記的羊抗小鼠二抗聯(lián)科生物化學(xué)發(fā)光檢測試劑ThermoDH鼠單克隆抗體聯(lián)科生物預(yù)染蛋白marker碧云天X光膠片柯達(dá)二、二、實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1、組織中蛋白上清液的制備和濃度測定1把組織剪切成細(xì)小的碎片；2加入200μL裂解液，在勻漿機(jī)中研磨，直至裂解液中組織消失。貴州細(xì)胞實(shí)驗(yàn)第三方檢測中心成都瑞普信生物技術(shù)有限公司第三方檢測WB實(shí)驗(yàn)。

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GSDME全長蛋白在切割前是沒有活性的，N端和C端結(jié)構(gòu)域之間的分子內(nèi)相互作用調(diào)控自抑制。caspase-3可以將全長GSDME，剪切成有活性的N端（包含1-270a段的GSDME-N）和C端（GSDME-C）。如果需檢測到N端或者C端的GSDME片段，細(xì)胞通常需要誘導(dǎo)處理。在檢測GSDME全長時(shí)需注意，其表達(dá)水平因樣品類型（組織和細(xì)胞）而異，可能在部分組織和細(xì)胞株系表達(dá)，其表達(dá)水平也存在差異，因此需要對樣品處理和WB實(shí)驗(yàn)進(jìn)行一些優(yōu)化。建議設(shè)置陽性和陰性對照。并且組織樣本成分更復(fù)雜，在WB實(shí)驗(yàn)時(shí)可能出現(xiàn)多條條帶現(xiàn)象。成都瑞普信專業(yè)第三方檢測公司W(wǎng)B,QPCR,ELISA。

磷酸化蛋白的WB第三方檢測在實(shí)操過程中有哪些注意事項(xiàng)？“研究完某一蛋白的磷酸化情況后比較好也要研究一下該蛋白總的表達(dá)量 ”。這有兩種方法，一是：相同的 sample 在不同的 well 中上樣兩次，可在相同的gel上，也可在不同的gel。其一壓磷酸化蛋白，另一壓該蛋白總的表達(dá)量（包括磷酸化和未磷酸化的該蛋白），甚至還可跑另一個(gè) gel ，壓內(nèi)標(biāo)。但是本人不建議如此做，因?yàn)檫@樣比較時(shí)誤差還是較大的。因此，比較公認(rèn)的，本人也建議如此的方法，即：將原先結(jié)合上的磷酸化抗體及二抗用 strip solution 洗去。成都瑞普信生物技術(shù)有限公司專業(yè)第三方檢測QPCR。西藏生物試劑第三方檢測中心

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