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每層鋪好后先趕走氣泡再鋪另一層。在轉移緩沖液中制備三明治可避免氣泡的產生。④接上正負極,按膜向正極的方向將轉移盒放入電轉儀中,加入轉膜緩沖液。⑤將電轉儀置于冰水中,100V恒壓轉膜1h。⑥轉膜結束后,快速取出PVDF膜,放入5BSA室溫封閉2h。⑦取出膜,于搖床上用TBST洗膜5min3次。⑧孵育袋中加入TBST稀釋的一抗(1500)4℃孵育過夜。⑨TBST洗膜5min3次,辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗小鼠二抗(13000),室溫孵育1h。⑩TBST洗膜10min3次。膜于化學發光檢測試劑反應至暗處出現亮條帶,取出膜,甩去多余的液體,用保鮮膜包好PVDF膜,暗室中用X膠片感光、顯影、定影。三、實驗結果蛋白DH。時間就是金錢,效率就是生命唯有惜時才能成功,唯有努力方可成就。成都免疫組化第三方檢測機構
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