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WB(Westernblot),即蛋白印跡或免疫印跡(immunoblotting),是一項在分子生物學、生物化學、免疫學等領域中應用非常廣的技術。這一技術利用抗體與組織或細胞樣品中特定蛋白的特異性結合作用,根據顯色條帶的位置和強弱實現蛋白鑒定和表達分析。WB技術具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性。選用合適的內參抗體能夠校正蛋白定量和上樣過程中的誤差,通過灰度計量可以定性或定量分析不同樣品中蛋白表達情況。做第三方檢測時為什么有時候條帶會出現拖帶或者彎曲?在使用特定裂解緩沖液時,或者一些植物或脂肪含量高的樣品中成分較復雜,會對電泳條帶產生干擾;樣品變性不徹底、有降解發生、修飾、上樣過大等情況會導致拖帶,凝膠不均勻、電泳裝置滲漏、電壓/電流過大、膠孔不平等原因會導致條帶彎曲,當很小分子量的蛋白電泳到接近凝膠下沿時也會出現條帶扭曲。瑞普信生物技術有限公司專業第三方檢測Western Blot。
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“做miRNA下調,QPCR檢測miRNA,表達水平無變化”如何解決呢?反義核酸是在轉錄后水平發揮功能,要阻斷miRNA的產生,理想情況是在生成成熟的miRNA之前阻斷。此要求目前唯有CRISPR / Cas9能實現,Cas9通過在pre-miRNA序列中引入突變,從而破壞miRNA表達,是miRNA基因功能缺失研究的一種新方法。福建肖老師運用Cas9技術,針對miR-21基因設計sgRNA ,通過慢病毒遞送細胞,并在RNA水平檢測到mir-21的下調表達,從而研究出miR-21耗竭對CNE2鼻咽(NPC)細胞生物學特性及其潛在機制的影響。使用Cas9敲除miR-21之后,功能上也呈現出陽性,此外,溫醫大醫院的張老師使用Cas9敲除mir-545,研究了人環狀RNA PRKCI(circPRKCI)通過抑制miR-545顯示致性,促進人類神經膠質瘤細胞的病理進展3。所以,CRISPR / Cas9對于miRNA的KO是有效的、被認可的、且以QPCR檢測表達量完全沒有問題。四川細胞造模第三方檢測報告
成都瑞普信生物技術有限公司是一家成都瑞普信生物技術有限公司成立于2012年11月底,主營生物實驗代測、技術咨詢、生物實驗耗材及儀器設備銷售等業務。公司擁有一支高學歷高素質的人才隊伍,深耕生物實驗行業多年,擁有豐富的產品銷售經驗、專業知識,實驗團隊人員均是研究生學歷、本科學歷,公司以用心做事、眾志成城,為祖國科研進步而努力為文化,激勵每位員工奮斗前行。的公司,是一家集研發、設計、生產和銷售為一體的專業化公司。瑞普信擁有一支經驗豐富、技術創新的專業研發團隊,以高度的專注和執著為客戶提供ELISA檢測,WB檢測,ELISA試劑盒,PCR試劑。瑞普信不斷開拓創新,追求出色,以技術為先導,以產品為平臺,以應用為重點,以服務為保證,不斷為客戶創造更高價值,提供更優服務。瑞普信始終關注醫藥健康行業。滿足市場需求,提高產品價值,是我們前行的力量。