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來源: 發布時間:2023-05-24

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WB第三方檢測對于提供的樣本有什么要求?請提供的細胞數量保證5x106或更多,動物組織至少200mg以上,植物組織1g以上,須在取材后(比較好經液氮速凍)保存于-80℃,干冰運輸。取材時需盡量避免較多血液、泥土等干擾保留在材料表面,可用生理鹽水等迅速清洗后速凍。檢測抗體數量增多時樣本質量須隨之增加。WB第三方檢測實驗中一抗使用量需要多少?為什么有時目的條帶大小同理論預期分子量有偏差?當條帶所示的實際大小同理論有偏差時,可能由以下一些原因導致:蛋白發生如磷酸化、糖基化等翻譯后修飾時條帶會上移,蛋白發生剪切(如前體)時條帶會下移,蛋白存在不同的可變剪切體或亞型,強相互作用大分子存在時變性不徹底。此外,WB實驗中使用的預染蛋白marker由于攜帶染料程度不穩定的原因,也可能導致表觀分子量與理論預期出現偏差。

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WB(Westernblot), 即蛋白印跡或免疫印跡(immunoblotting),是一項在分子生物學、生物化學、免疫學等領域中應用非常廣的技術。這一技術利用抗體與組織或細胞樣品中特定蛋白的特異性結合作用,根據顯色條帶的位置和強弱實現蛋白鑒定和表達分析。WB技術具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性。選用合適的內參抗體能夠校正蛋白定量和上樣過程中的誤差,通過灰度計量可以定性或定量分析不同樣品中蛋白表達情況。做第三方檢測時為什么有時候條帶會出現拖帶或者彎曲?在使用特定裂解緩沖液時,或者一些植物或脂肪含量高的樣品中成分較復雜,會對電泳條帶產生干擾;樣品變性不徹底、有降解發生、修飾、上樣過大等情況會導致拖帶,凝膠不均勻、電泳裝置滲漏、電壓/電流過大、膠孔不平等原因會導致條帶彎曲,當很小分子量的蛋白電泳到接近凝膠下沿時也會出現條帶扭曲。瑞普信生物技術有限公司是專業的第三方基礎實驗檢測服務商。甘肅免疫組化第三方檢測公司

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