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qPCR第三方檢測方法的分析驗證有哪些內容？效率不僅是PCR效率，還包含反轉錄（Reversetranscription，RT）的效率。RT效率是指RNA合成cDNA的效率，如果1,000個RNA分子變成1,000個cDNA分子，效率就是100%，實際上很多RT酶的效率對于不同濃度的RNA樣本存在差異，這樣cDNA擴增后的結果并不能真實反映樣品中RNA的水平。PCR效率是指DNA在擴增的每個循環中復制的效率， 每個循環增加2倍，其效率就是100%，這也和所選試劑、引物、模板質量密切相關。梯度稀釋實驗得到的標準曲線可直觀地顯示各濃度理論值和測得的Cq值的相關性，其中R2值表示各個數據點是否正好落在標準曲線上，當R2<0.98時，表明數據偏差較大。

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