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浙江超微量分光光度計探針檢測

來源: 發布時間:2023-05-11

Micro Drop基座檢測需要的樣本量:
雖然基座檢測時樣本的量不是特別關鍵,但是必須保證兩根光纖之間形成完整的液柱,這樣才能保證兩根光纖之間形成樣本液橋。
決定液滴表面張力的主要因素是溶液中水分子的氫鍵結合力。通常情況下,溶液中所有的溶質(包括:蛋白,DNA,RNA,鹽離子,去垢劑分子)都會降低表面張力,因為這些分子能夠和水分子的氫鍵產生作用。雖然一般情況下1μl的樣本就足可以檢測了,但對于那些表面張力比較小的樣本比較好使用2μl樣本來檢測。
現場試驗的經驗表明下列樣本的用量足夠得到準確重復性高的檢測結果:
核酸水溶液:1μl;
純蛋白:2μl;
Bradford,BCA,Lowry或者蛋白Pierce 660nm試驗:2μl;
微生物細胞懸浮液:2μl。
分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。浙江超微量分光光度計探針檢測

超微量分光光度計不僅涵蓋了可見光分光光度計的功能而且也可以進行紫外分光光度計的應用:
(二)UV-VIS常規可見-紫外檢測:
全波長超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。**多可以同時指定檢測40個波長下的吸光值并把數據顯示在報告中。
(三)蛋白質的直接定量(UV法):
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
河南高靈敏度超微量分光光度計物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準確,樣品內有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。

Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein & Labels檢測類型:
Protein & Labels可以用來檢測蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標記物)。它還可通過吸光值的比值來檢測金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準確檢測100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質,在檢測方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測樣品的類型,默認的設定為1 Abs=1mg/ml。
4. 選擇濃度單位,默認的單位是mg/ml。
5. 使用下拉菜單來選擇染料,默認的染料1為Cy3,染料2為Cy5。
6. 可以選擇基線校正,默認的校準波長為340nm,也可以重新輸入一個校準波長。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結果。
8. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對照,空白對照液體能夠溶解目標溶液。空白對照液體的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣。
A320nm 或A340nm——是基線校準波長,為檢測溶液樣品的濁度和其他干擾因子。

Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。當使用微量,半微量或者超微量的比色皿時,我們建議使用周邊不透明的比色皿,不透明的比色皿保證了光穿過樣本后全部到達檢測器。而透明的比色皿會讓那些沒有透過樣本的光也到達檢測器,這樣會導致樣品(特別是低濃度樣品)的檢測不準確。
當檢測的波長為紫外區域時(<340nm),要使用石英比色皿,這樣才能透過紫外光。雖然有一些制造商提供紫外透過的一次性塑料比色皿,但是即使質量比較好的塑料比色皿也不能讓低于220nm以下波長的紫外光透過,而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透過性的。
一般單光束的分光光度計都會推薦相配的比色皿,而許多比色皿生產廠家都有嚴格的質控來保證比色皿的性能而不用在換比色皿時需要校準,這些比色皿都可以用在本產品上。
使用Micro Drop可以很方便的檢測核酸的濃度和質量。浙江操作簡便超微量分光光度計探針檢測

核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。浙江超微量分光光度計探針檢測

傳統分光光度計:
樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上;
需使用比色皿,每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重;
光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小;
燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成,壽命短;
需要預熱半個小時以上;
顯示吸光度值,不顯示濃度值;
儀器體積大,質量重;
超微量分光光度計;
所需樣品體積小,*需1~2μL;
不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上;
具有多個光程(電機控制自動選擇光程),樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規分光光度計的50倍;
氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩定;
不需要預熱,可隨時檢測;
顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)。
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