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上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

來源: 發布時間:2023-05-17

超微量分光光度計在核酸定量和分析中的應用:
分光光度測定法是一項定量和分析生物成分的成熟技術。其中,核酸是生物實驗室**常檢測的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對許多下游實驗至關重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應用朗伯比爾定律通過它們的相關消光系數和樣品光程計算出來。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過樣品,而另一邊的光電檢測器則測定有多少光被吸收。通過對照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

Micro Drop比色皿檢測基本操作:
1. 準備好兩個比色皿,一個加入空白檢測液,一個加入樣品,保證加入的液體量足夠,能蓋過光束,光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請按照比色皿生產廠家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂,把比色皿插入到儀器中,插入比色皿時要注意透光面,與儀器上面的光路指向的方向相對應。
3. 在做比色皿檢測時樣品臂必須放下來。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項”框中選擇“使用比色皿”, 插入比色皿,勾選基線校正,設置相應參數進行空白檢測及檢測。
5. 當檢測完成后,移出比色皿,倒出樣品,清洗干凈比色皿。
天津超微量分光光度計紫外檢測核酸的較高吸收峰的吸收波長260nm。

在分光光度計中,將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長(λ)為橫坐標,吸收強度(A)為縱坐標,就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質的方法,稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質的方法,稱為可見光光度法。它們與比色法一樣,都以Lambert-Bee定律為基礎。上海寶予德科學儀器有限公司歡迎大家來電咨詢!

Micro Drop基座檢測空白循環:
我們建議把空白對照當成樣品來檢測,這樣可以確認儀器性能完好并且基座上沒有樣品殘留,按下列操作來運行空白循環:
1. 軟件中打開將進行的操作模式,把空白對照加到基座上,并把樣品臂放下。
2. 點擊空白檢測來進行空白對照檢測并保存參比圖譜。
3. 重新加空白對照到基座上,把它當成樣品一樣來檢測,點擊檢測,結果應該是差不多為一水平線,吸光
值變化應不超過0.04A(10mm光程)。
4. 擦去上下基座上的液體,重新進行上面的操作,直到檢測光譜圖的變化不超過0.04A(10mm光程)。
雖然不需要在每個樣品之間進行空白檢測,但我們建議在檢測多個樣品時,比較好每30min進行一次空白檢測。
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。

比色皿的清洗:
1、拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面。 
2、不得將光學面與硬物或臟物接觸。加入溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。 
3、凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。
4、比色皿在使用后,應立即用水沖洗干凈。必要時可用1∶1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。 
5、不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或干燥箱內烘烤; 
6、在丈量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測。用戶可將波長選擇置實際使用的波長上,將一套比色皿都注進蒸餾水,將其中一只的透射比調至95%(數顯儀器調置100%)處,丈量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 無論選擇玻璃還是石英比色皿,都必須配對使用,即玻璃配玻璃的,且型號寬度都應該一致。
分光光度計是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。江西超微量分光光度計紫外檢測

用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

超微量分光光度計檢測蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強的多樣性。Protein A280功能應用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構建標準曲線,而是檢測吸光度后,直接計算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測280nm處的吸光度后計算濃度(mg/ml)。和核酸檢測一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數據。
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