分光光度計,又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200~380 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。上海寶予德科學儀器有限公司歡迎來電咨詢!Lowry法的原理是蛋白質與Cu2+反應,產生藍色的反應物。重慶雙檢測模式超微量分光光度計樣品檢測
超微量分光光度計不僅涵蓋了可見光分光光度計的功能而且也可以進行紫外分光光度計的應用:
(二)UV-VIS常規可見-紫外檢測:
全波長超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。**多可以同時指定檢測40個波長下的吸光值并把數據顯示在報告中。
(三)蛋白質的直接定量(UV法):
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
上海全光譜波長超微量分光光度計紫外檢測寶予德MicroDrop超微量分光光度計既可使用超微量基座,也可使用常規比色皿檢測。
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性或定量分析。常用的波長范圍為:(1)200~380nm的紫外光區,(2)380~780nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。
Micro Drop為一款全波長(185~910nm)超微量紫外可見分光光度計,不僅提供了便于測量小劑量樣本的基座模式,也可以使用傳統的比色皿來進行樣本檢測。
基座模式下,本產品可以檢測0.5-2μl的樣本,而且檢測具有非常高的準確性和重復性。使用基座模式檢測樣本時,樣本保留系統應用了表面張力來把樣本保留在兩根檢測光纖中間,這使得儀器可以檢測較高濃度的樣本而不用稀釋,測量濃度范圍可達普通分光光度計檢測濃度范圍的200倍,且可實時調控光纖之間的液柱高度,以獲得更準確的檢測數據。相對于傳統的比色皿檢測方法,基座模式免去了復雜的比色皿清洗過程,只需使用無塵紙擦拭,清理簡便。另外,對于濃度低、易揮發或者表面張力比較低不易形成液柱的樣品,可以使用比色皿進行測量。
開機后,按鈕亮起并持續保持光亮,在檢測過程中,按鈕指示燈會閃爍表示儀器正在運行中。本產品無需預熱,即可直接進行測量,操作簡單,快捷,且軟件可以直接給出濃度值。此外,本產品體積小,質量輕,便于攜帶。
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性或定量分析。
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。
熒光分光光度計和紫外可見分光光度計是實驗室常用的光學儀器。山東操作簡便超微量分光光度計
MicroDrop使用長壽命氙燈,滑動軸承結構的升降檢測基座,確保檢測的穩定性和儀器的使用壽命。重慶雙檢測模式超微量分光光度計樣品檢測
A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準確,樣品內有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。
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