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山東全自動酶標儀Elisa實驗

來源: 發(fā)布時間:2023-06-10

酶標儀的使用:
1. 準備工作:在使用酶標儀之前,需要將儀器進行預熱,并根據實驗需要選擇合適的濾光片。同時,需要將標準曲線和待測樣品的反應體系準備好。
2. 測量吸光度:將標準曲線和待測樣品分別加入反應體系中,然后將反應體系放入酶標儀中進行測量。在測量過程中,需要選擇合適的波長和濾光片,并設置好空白對照組。
3. 計算結果:根據測量結果,可以計算出待測樣品中物質的含量。具體計算方法如下:
(1)根據標準曲線計算出各個標準品的吸光度值和物質含量。
(2)根據待測樣品的吸光度值和標準曲線計算出待測樣品中物質的含量。
(3)根據實驗需要進行數據處理和統計分析。
國內多家機構,如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統等多次強調酶標儀的重要性。山東全自動酶標儀Elisa實驗

TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有比較大消光系數,如果HRP量少,H:O:和TMB過量時,則形成藍色的陽離子根。降低pH,即可使藍色的陽離子根轉變?yōu)辄S色的聯苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產物穩(wěn)定90min。因此,450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件,可以同時安裝6~8片濾光片,所配備的濾光片均應包括上述兩個波長,有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,影響不大。除了這兩個基本濾光片外,考慮到雙波長比色的需要,還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片,其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時,有的實驗室希望用酶標儀作微量生化測定,故酶標儀生產廠家對其生產的酶標儀擴展了紫外檢測功能,此時需要一個340 nm波長濾光片。此時,酶標儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。北京雙檢測模式酶標儀高清觸屏K3 Plus酶標儀擴展內存可以儲存多達500個測定方法。

K3 Plus酶標儀**于測量通過微孔板的吸光度值,采用8通道垂直檢測光路光密度檢測理念,**多可同時配置8塊濾光片,波長范圍400~750nm,儀器性能穩(wěn)定,更大的彩色液晶觸摸屏,可視用戶界面,簡單易用,在各種科研應用中具有出色的靈活性。
產品特點:
8通道垂直光路設計,提供標準的光度測量;
檢測波長范圍400nm-750nm,適合各種科研應用 ;
雙檢測模式(連續(xù)和步進),測量96孔板*需5秒,速度快且重復性好。
多種程序檢測模式可選,包括單波長、雙波長、雙時法、動力學及多波長模式
系統內置開機自我診斷程序,確保儀器性能的穩(wěn)定可靠 ;
較大彩色液晶觸摸顯示幕,中英文界面,易于使用;
三檔速度可調的線性振蕩功能,滿足更多實驗需求。

酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值大小。隨著檢測方式的不斷發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發(fā)光(Lum)。酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片,只能截取特定波長進行檢測。可廣泛應用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braford/Lowry),酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。K3 Plus酶標儀顯示屏內置軟件界面,分別4大菜單界面。

寶予德K3 Plus酶標儀光學系統包括以下部件:
光源:光源為裝有鍍鋁橢圓反射器的石英鹵鎢燈(Osram 64607A,8V/50W)。為了延長燈具的使用壽命,不使用時請關閉儀器。開始測量前,必須先預熱一(1)分鐘。
斬光輪:斬光輪截斷光束,以盡可能減少電子噪音。
半透明鏡:光束穿過聚光透鏡后照射到半透明鏡上。部分可見光與所有長波長均穿過鏡片及UV,而剩下的可見光反射到其它地方。此裝置能夠減少干涉濾光片的發(fā)熱,并使光譜強度分布均勻。
干涉濾光片:濾光片輪的一到八(1到8)個濾光片中選擇波長。
光纖束:穿過干涉濾光片后,光束到達光纖束的端點,光束折射為八(8)束平行向上的光線。
聚焦透鏡:經折射后,光線穿過由八(8)個透鏡組成的聚焦系統。
檢測器:光束經孔板底部,樣品及上部透鏡,***進入檢測器,由檢測器測量光的強度。
K3 Plus酶標儀適用于測量通過微孔板的吸光度值。山東全自動酶標儀Elisa實驗

光柵式酶標儀使用方便靈活,可以通過軟件選擇任意波長的光。山東全自動酶標儀Elisa實驗

合適的軟件功能對于ELISA定量測定同樣很重要。有研究表明,四參數方程能較好地反映免疫測定的劑量反應曲線,*為適合于定量酶免疫測定的曲線擬合。因此,如目的是定量測定,則在酶標儀的軟件功能中,要有這種曲線回歸方程計算分析功能。其他諸如連點、直線等回歸計算,則可根據酶標儀的應用目的而定,如兼用于微量生化測定,則此類回歸計算就很有必要。此外,酶標儀兼做酶標動力學、凝集反應測定所需的軟件是否應具備,當然也應根據使用目的而定。由于此類軟件一般都較為昂貴,酶標儀常另外單獨按需配備,如果不是實驗室特殊需要,就不必強求這種軟件功能。山東全自動酶標儀Elisa實驗

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