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湖北超微量超微量分光光度計核酸檢測

來源: 發布時間:2023-06-10

分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。
熒光分光光度計有兩個單色器,而一般紫外可見分光光度計只有一個單色器。湖北超微量超微量分光光度計核酸檢測

超微量分光光度計在核酸定量和分析中的應用:
分光光度測定法是一項定量和分析生物成分的成熟技術。其中,核酸是生物實驗室**常檢測的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對許多下游實驗至關重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應用朗伯比爾定律通過它們的相關消光系數和樣品光程計算出來。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過樣品,而另一邊的光電檢測器則測定有多少光被吸收。通過對照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
海南超微量超微量分光光度計菌液檢測Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準確,樣品內有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。

Micro Drop超微量分光光度計產品應用:
1.紫外檢測:常規紫外光波長下檢測樣品吸光值;
2.核酸檢測:可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值;
3.探針檢測:檢測熒光標記探針的吸光值,可用于去除未能標記探針的樣品;
4.蛋白檢測:檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值,BCA、 Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
5.菌液/懸浮細胞濃度檢測:可檢測菌液OD600值及監測懸浮細胞生長情況;
6.動力學檢測:用于酶活力和生長曲線等動力學實驗的測定;
7.全波長掃描:185-910nm全波長掃描,顯示吸收曲線。
使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀。

超微量分光光度計新晉小生——寶予德MicroDrop簡介:
一機多用:既可使用超微量基座,也可使用常規比色皿,想怎么測就怎么測!
開機即用:交貨后即可使用 – 安裝時不需要進行任何調節。
上樣量少:上樣范圍0.5μl-2μl,節約珍貴的樣本。
無線連接:無需數據線連接電腦,從此告別雜亂的數據連接線,儀器可自發WiFi信號。
全光譜范圍:可檢測185-910nm波長下樣本的吸光值,檢測范圍廣,基座模式下因為縮短了光程,檢測濃度范圍非常廣闊,dsDNA:2-15000ng/ul,無需稀釋樣品,簡化實驗流程,減少實驗誤差,能夠滿足極大部分用戶的需求。
檢測快速:全波長掃描時間只需5s,每個樣品所需要的時間不到5秒鐘,快速的檢測速度為大量的樣品檢測節省了寶貴時間。
美觀簡約:自重2.1kg,便于移動,占地面積小,節省實驗臺面空間。
數據存儲:可自定義選擇數據存儲,不僅能夠自動保存檢測原始數據,也可導出Excel數據表,方便計算后續實驗的加樣量。
Micro Drop在基座模式下可以較高檢測400mg/ml的BSA而不用稀釋。貴州高重復性超微量分光光度計菌液檢測

熒光分光光度計是以氙燈做為光源,而紫外可見分光光度計是以氘燈作為紫外區光源。湖北超微量超微量分光光度計核酸檢測

超微量分光光度計的應用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率比較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈DNA、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的比較高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。如:1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經過上述系數的換算,從而得出相應的樣品濃度。除了核酸濃度,分光光度計顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
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