小腸絨毛是營養物質消化吸收的主要部位,其絨毛高度變化顯示小腸上皮細胞的功能狀況,而隱窩深度則顯示上皮細胞的增殖狀況,這2個形態學指標作為仔豬小腸發育和成熟的主要標志被***研究和采用[14215]。此外,通過電鏡觀察可以更為直觀地對小腸形態結構的完整性和發育程度進行觀察。本研究對哺乳仔豬小腸黏膜絨毛高度與隱窩深度進行了分析測定,結果表明,增加泌乳母豬飼糧精氨酸水平可以提高哺乳仔豬小腸黏膜絨毛高度,同時降低其隱窩深度。該結果提示,提高泌乳母豬飼糧精氨酸水平能夠增加哺乳仔豬小腸黏膜成熟細胞的數量和小腸黏膜的表面積,有效促進哺乳仔豬小腸發育和成熟。電鏡觀察顯示,與0182%精氨酸組相比,1123%和1164%精氨酸組哺乳仔豬小腸黏膜絨毛多而整齊,提示其有更好的發育狀態。究其原因,可能與乳中包括精胺與IGF2Ⅰ在內的多種活性分子含量增加有關,后者能促進哺乳仔豬小腸發育和成熟。程志斌[11]報道仔豬口服精胺能夠增加小腸重量,提高空腸和回腸黏膜蛋白質含量以及DNA、RNA濃度。Buts等[16]報道口服精胺可以增加大鼠小腸長度和重量,提高黏膜重量和DNA含量。腐胺可以為小腸提供能量,并且已經證實腐胺對小腸發育的影響是間接效應。
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妊娠第16天開始添加精氨酸對母豬繁殖性能有促進作用。高開國等(2008a)給妊娠第22天~分娩母豬補飼精氨酸,有效地提高了母豬的產仔數和產活仔數,并且提高了窩重和活仔總數。此外,由于外源性精氨酸增加,提高了豬肌肉**中蛋白質周轉和合成(Bruins等,2002),因此在妊娠母豬日糧添加精氨被利用,代謝的主要產物是脯氨酸、鳥氨酸和尿素。精氨酸在胞質溶膠或線粒體中經精氨酸酶作用產生的鳥氨酸,可以被鳥氨酸轉氨酶(OAT,一種線粒體酶)轉變為二氫吡咯-5-羧酸(P5C)進而生成脯氨酸,或通過鳥氨酸脫羧酶(ODC)、亞精胺酶和精胺酶(三者均為胞質溶膠酶)合成腐胺、亞精胺或精胺。由于能使脯氨酸變成P5C的脯氨酸氧化酶活性的缺乏,豬乳腺**中精氨酸來源的脯氨酸不發生降解,這確保了精氨酸在乳腺**比較大的脯氨酸凈生成量。同時,由于母豬乳腺**缺乏P5C合成酶,未發現該**谷氨酰胺或谷氨酸生成脯氨酸,所以精氨酸酶在泌乳母豬乳腺**脯氨酸合成中扮演重要角色。再者,泌乳母豬乳腺**P5C還原酶(P5CD)的活性遠高于P5C腺**通過乳腺細胞基底膜特定的氨基酸轉運系統從血漿吸收氨基酸,因此血漿精氨酸比較大的乳腺吸收量可視為合成乳蛋白的乳腺內必需氨基酸生理需要。
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使用精氨酸和AAA可以使母乳飼養的仔豬生長提高55~60%。在7日齡的仔豬中添加50mg/kgBW的AAA比對照組體重提高了28%,***提高了背**長肌、腓腸肌、十二指腸等的蛋白質合成率;血清精氨酸和生長***水平也***提高(Frank等,2007,Wu等,本實驗室研究表明,在21日齡斷奶仔豬的日糧中添加的AAA或者6g/kgL-Arg飼喂7d后,均可***地提高其日增重,并且降低斷奶仔豬血清氨和尿素氮的濃度,日糧中添加/kgAAA***降低了腹瀉率;進一步研究表明,AAA有效地提高了仔豬血清精氨酸濃度,進而增強了機體***,促進仔豬生長;但是日糧中高水平的AAA(/kg)則導致仔豬腹瀉,具有一定的副作用(印遇龍等,2008)。這可能與合成過高水平的精氨酸進而產生過多的NO,產生氧化應激所致。精氨酸亦可以修復腸黏膜損傷,這為通過AAA有效地防治幼齡動物的胃腸道代謝綜合征提供了新途徑。進一步研究表明,日糧中添加/kg的AAA可以促進斷奶仔豬腸黏膜應激蛋白(HSP70)基因的轉錄和轉錄后的表達水平,并且提高了CD4的表達水平,從而提供了仔豬***。有關精氨酸對母豬營養研究,主要集中在提高母豬繁殖性能上。窩仔數是衡量母豬繁殖性能的一個重要指標。
研究人員未能鑒別出豬乳中在生理上具有重要作用的多種氨基酸(鳥氨酸、瓜氨酸、谷氨酰胺和牛磺酸),為此我們開始了多項研究以對母豬初乳和泌乳期第1~28天的常乳中游離型和蛋白結合型氨基酸進行了定量測定(Wu和Knabe,1994)。令人驚奇的是,豬乳中游離型谷氨酰胺的含量隨著母豬哺乳期的延長而逐漸升高,并于哺乳期第28天達到mM的比較高平均值(圖2);而相比較而言,哺乳母豬同期的血漿谷氨酰胺濃度*為~mM。與此相反,在哺乳期全部哺乳日中,豬乳的精氨酸含量(游離型+蛋白質結合型)**低于由谷氨酰胺與谷氨酸、脯氨酸、賴氨酸及支鏈氨基酸(Branched-ChainAminoAcids,BCAA)所組成的含量(表2)。母豬初乳或常乳的游離型精氨酸含量極低,還不到其總精氨酸含量的(Wu和Knabe,1994)。如按克計算,母豬哺乳第7天的常乳和7日齡仔豬的**蛋白中,精氨酸/賴氨酸比率分別為和(Wu等,2004d)。
通過提高細胞線粒體NAG水平,可能促進小腸瓜氨酸合成,從而增加內源性精氨酸供給。哺乳仔豬日糧中添加NAG可以成為***腸道瓜氨酸合成下降的一個有效方式,進而促進精氨酸的營養,提高日糧氨基酸合成蛋白質的利用率(Wu等,2004)。然而,哺乳動物的腸上皮細胞中降解NAG的脫酰(基)酶的活性很高,而限制了通過外源性添加NAG提高其線粒體濃度的途徑(Meijer等,1985)。。精氨酸生素(ArginineActivatorAdditive,AAA)是尿素循環中鳥氨酸生成瓜氨酸的中間體-NAG的類似物,可以***尿素循環中的***個酶CPS-Ⅰ——腸上皮細胞合成精氨酸過程中的一個關鍵的酶(Elhaji等,2004)。用AAA***NAGS缺乏的病人后,同位素標記的15N,血氨和血中谷氨酰胺含量***降低,血清尿素含量提高了2~3倍(Tuchman等,2008);用AAA***甲基丙二酸尿的病人,***增加了尿素含量,同時降低了血中谷氨酰胺、丙氨酸和甘氨酸含量,表明AAA的攝入影響氮代謝(Gebhardt等,2005,Jones等,2008)。許多研究發現,AAA在內源性精氨酸的調控中具有明顯的效果。體內和體外試驗證明,AAA促進了14日齡仔豬小腸上皮細胞瓜氨酸和精氨酸合成(Wu等,2004)。從日糧的管理途徑提高哺乳仔豬精氨酸或者瓜氨酸來說,添加AAA具有獨特的優勢。
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生成的O2-可使酶類及非酶類的物質還原并可產生反應性更高的活性氧[26]。SOD和GSH2Px是重要的抗氧化系統成員,能***超氧陰離子自由基(AOR),保護細胞免受損傷[27230]。脂質過氧化物MDA是由活性氧以及由之觸發的脂質過氧化的終末產物,反映機體內脂質過氧化的程度,間接地反映出細胞損傷的程度[31]。因此,檢測SOD、GSH2Px的活性和MDA的含量,可以反映機體***自由基的能力及細胞受損的嚴重程度。本試驗分別對小腸黏膜GSH2Px、SOD活性和MDA含量進行了檢測,結果表明,與0182%精氨酸組相比,1123%和1164%精氨酸組哺乳仔豬小腸GSH2Px和SOD活性明顯升高,而MDA含量有所下降,說明泌乳母豬飼糧精氨酸水平升高增強了哺乳仔豬小腸黏膜抗氧化保護能力,其機理可能與乳中精胺和IGF2Ⅰ含量增加有關。Farbiszewski等[32233]研究證實精胺對機體抗氧化酶有保護作用,而García2Fernández等[34235]也發現IGF2Ⅰ能夠減少自由基對機體的氧化損傷。盡管目前尚未見到乳源精胺和IGF2Ⅰ改善仔豬腸道抗氧化機能的報道,但本試驗結果一定程度上說明了提高泌乳母豬飼糧精氨酸水平,可以通過增加乳中精胺和IGF2Ⅰ的含量來改善哺乳仔豬體內如小腸黏膜抗氧化機能,進而促進小腸黏膜的正常發育。河北精氨酸生素產品推薦
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