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江蘇動物檢疫PCR檢測方法

來源: 發布時間:2023-08-21

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產量的技術,即所謂的聚合酶鏈式反應,這種技術可以在數小時內大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點,PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液、眼鼻分泌物、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復制,再以核酸電泳的方式判讀結果,從而獲得早期、快速、穩定和準確的診斷結果.微流控PCR技術是一種通過將PCR反應微型化來實現PCR反應的高通量、低成本和快速的方法。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

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巧亦捷全自動薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術,保障結果準確:其采用Taqman熒光探針和經典PCR擴增技術,能夠將生物標志物精確定量,同時輸出Ct值和擴增曲線,結果判讀簡潔明了;質控更全1面,結果更可靠,設備體積小巧,便于搬運和攜帶,可在多種場景下隨心使用,且薄膜微流控芯片為封閉系統操作,可很大程度避免人為和環境的污染,降低對檢測環境的要求,以及對檢測人員的要求。更適合寵物醫院、獸醫站、養殖場等多種使用場景。動物PCR擴增巧亦捷全自動核酸檢測一體已實現覆蓋貓、犬腸道類、呼吸道類、血液類、人畜共患類等多種病原體的診斷。

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PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環,2-4分鐘即可完成一個循環,2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。

當犬貓的一些疾病處于潛伏期時,該階段動物體內的病原體含量過低。而目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內是否產生對抗某種病原的抗體,雖然快速,但在初期傳染時,寵物免疫系統尚未產生抗體,所以檢測出現偽陰性,進而延誤診療。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一體機則可以很好的解決這一問題,即便處于疾病潛伏期,巧亦捷核酸一體機也可以得到準確的檢測結果,做到早期診斷,實現及時診療,減少患病動物痛苦,獲得更好的療效。預后評估,監控診療效果。傳染性疾病在寵物中比較常見,由多種病原體如寄生蟲,細菌,病毒等引起,且多具有傳染性,死亡率也較高。

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使用平常的抗原試紙做動物診斷常會出現誤診的情況,如用抗原試紙條對剛買的小狗帶到做檢測,犬瘟試紙條檢測是陰性,但回家養幾天后小狗開始出現打噴嚏、咳嗽等癥狀,此時再去做檢查,犬瘟檢測則變成陽性,這種情況在寵物臨床上并不少見。很有可能這只小狗在第、一次檢查的時候已經傳染并且向外排毒了,但是由于抗原滴度低排毒量比較小,試紙條檢測不出來,錯失了及早診療的機會。另一方面,抗體檢測試紙并不能及時準確知道機體是否傳染這個病原,就比如現在常見的貓咪弓形蟲檢測,只有貓咪接觸病原一段時間后,才能產生足量的抗體,抗體試紙才出現陽性結果。當這些情況發生,結果都是令人很難過的。因為這不僅*意味著后期要花更多的Money用于診療,還會出現診療困難,毛孩子們受罪,甚至會出現我們都不愿意接受的死亡。所以我們更建議使用PCR技術進行臨床診斷。巧亦捷核酸檢測一體機可以為寵物PCR檢測提供嚴謹的準確結果,為檢測人員提供信心保證。江蘇PCR擴增

傳統的免疫學檢測(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

巧亦捷推出的全自動薄膜微流控快速核酸檢測一體機采用PCR熒光探針技術、通過大量臨床病例驗證,準確率高達99%,可以針對犬貓等寵物、畜禽動物、水產養殖動物等常見的傳染病進行快速、準確的核酸檢測,具有檢測速度快、靈敏度高、特異性強的特點,可以在動物患病早期未表現出明顯癥狀時及時進行準確判斷,有效杜絕漏檢、誤診的風險,幫助獸醫師們對動物疾病診斷實現早發現、早診斷、早診療、早康復,以減輕它們的痛苦,盡早恢復健康。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

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