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薄膜微流控PCR熒光檢測

來源: 發布時間:2024-04-24

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環,2-4分鐘即可完成一個循環,2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。巧亦捷采用的薄膜微流控技術與核酸檢測技術相結合,特別適用于基因表達和病原體檢測等領域。薄膜微流控PCR熒光檢測

薄膜微流控PCR熒光檢測,PCR

目前市面上有很多PCR儀器,一時間讓獸醫師無從選擇,但大多數都是PCR擴增儀,即需要人工進行核酸提取和純化。他們都有以下痛點:1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業的技術人員和場地,有些還需要配置高速離心機,人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導致污染。2、人工反復開蓋加入或倒出試劑,容易導致人為和氣溶膠污染,導致結果不準確。因此針對寵物醫院來說,需要一臺集核酸提取、純化和擴增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。蘇州寵物PCR儀器生產企業巧亦捷核酸檢測解決方案包括全自動便攜式核酸檢測一體機、免核酸提取檢測試劑盒。

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巧亦捷核酸一體機采用的探針法熒光PCR與常規PCR的不同之處在于:在上、下游引物外還加入了具有序列特異性的探針(探針本身具有熒光標記),該探針根據需要擴增的靶序列設計因此只能與待檢測序列結合,與染料法相比提高了實驗的特異性。目前市場上的探針主要種類有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探針應用寬泛。TaqMan探針的結構:長度與普通PCR引物類似,大約20bp左右。在5’與3’端各標記有一個熒光基團,5’的熒光基團稱為報告基團(Report),3’的熒光基團稱為淬滅基團(Quencher)。TaqMan探針的性能:在探針結構完整的情況下用特定的波長激發報告基團,由于報告基團與淬滅基團的空間位置很近,因此報告基團能夠通過FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)將接受的能量轉移到淬滅基團,使后者以發射熒光或熱量的方式釋放能量,而報告基團并不發射特定波長的熒光信號。

當犬貓的一些疾病處于潛伏期時,該階段動物體內的病原體含量過低。而目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內是否產生對抗某種病原的抗體,雖然快速,但在初期傳染時,寵物免疫系統尚未產生抗體,所以檢測出現偽陰性,進而延誤診療。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一體機則可以很好的解決這一問題,即便處于疾病潛伏期,巧亦捷核酸一體機也可以得到準確的檢測結果,做到早期診斷,實現及時診療,減少患病動物痛苦,獲得更好的療效。預后評估,監控診療效果。巧亦捷核酸檢測一體機的靈敏性和特異性上的優勢,像犬貓的呼吸道、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。

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巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(蘇州)有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產品品牌,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測,非洲豬瘟、藍耳等豬病核酸檢測,牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測,人畜共患病核酸檢測,以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機是巧亦捷系列產品的主打檢測平臺,巧亦捷基于此平臺技術致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。翊新診斷技術(蘇州)有限公司由微流控技術領域國際**周朋博士創立。公司依托先進的薄膜微流控技術開發一體化、智能化的快速、便捷的POCT體外分子診斷解決方案。針對動物疫病的早期診斷,公司以市場需求為出發點,開發出了低成本、無污染、能夠實現真正意義上“全自動,全封閉,樣本進,結果出”的薄膜微流控芯片技術和可以用于動物疫病現場快速診斷的分子檢測系統,從而為動物疫病的現場診斷提供更加便利的檢測手段。目前已開發非洲豬瘟檢測、寵物呼吸道多聯檢測、寵物消化道多聯檢測等多種試劑及檢測方案。克服其他檢測方法的缺點與目前臨床上已有的大部分病原檢測方法相比,巧亦捷核酸檢測一體機都有其獨特優勢。蘇州寵物PCR儀器生產企業

PCR是可以做到病原體準確診斷的技術,與膠體金試紙及熒光定量試紙的應用場景相同。薄膜微流控PCR熒光檢測

大多數寵物醫院運用的診斷方法為:PCR和試紙條。其區別是:試紙條原理是基于抗體抗原的免疫學方法,通過顏色或熒光標記來判讀,和PCR檢測是基于不同方法學的檢測方式。PCR通過檢測樣本中有無病毒DNA(RNA)來確診,靈敏度高、特異性強、支持檢測項目多,是人醫醫學界公認的診斷金標準,兩者區別可以理解為滴血認親(免疫學方法)與親子鑒定(分子診斷)的區別。目前專業的的寵物疾病機構就是使用PCR檢測。巧亦捷核酸檢測一體機采用國際**的薄膜微流控技術,實現了從核酸提取、PCR擴增、熒光檢測全流程自動化芯片內完成,可以實現專業實驗室級別的核酸檢測,且檢測時間短,全程無需專業技術人員參與,可實現基于病癥的多項目聯檢,更適合寵物醫院、獸醫站、養殖場等現場快檢應用場景。薄膜微流控PCR熒光檢測

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