針對單細胞測序的細胞數量判斷環節：主要是對細胞數量、基因表達量、測序質量進行整體描述。過濾標準：由于細胞破碎后游離RNA會釋放到環境或孔中，并且測序中也會存在一些死細胞，導致數據存在background值。因此，我們需要設定一定的標準來過濾掉假細胞或死細胞。以10× Genomics為例，細胞數量判斷主要通過分析UMI Counts-Barcode曲線斜率拐點，當存在多個斜率拐點的時候，結合預期UMI=500時的細胞數量進行過濾。當斜率拐點低于UMI=500的時候，選擇UMI=500作為細胞的判斷的標準；否則，選擇和預期細胞數量接近的拐點作為細胞判斷的位置。這樣我們能夠有效獲得真實的并且在基因數量上可以分析的數據?；诖胖锽arcode和UMI及polyT的探針結構，精細區分上萬個細胞中mRNA的來源及表達豐度。烈冰單細胞測序

烈冰生物成立于2010年，與時俱進，堅持為科研學者提供國際前沿的高通量測序實驗和深度的生物信息數據分析服務，已逐步發展為單細胞多組學檢測服務****。專注于“單細胞測序系列技術服務”的專精領域，在上海、北京、廣州、西安和江西等地擁有數千平辦公場所，并布局多中心產品研發生產基地和營銷、運營中心。2016年起連續被評為上海市****，60+項自主知識產權，轉化率近80%。產品覆蓋從單細胞測序，核測序，單細胞多組學，空間轉錄組測序等多組學聯合的實驗+數據分析全流程服務平臺。為600+國內高校和醫院、5000+深度合作學者用戶、10000+生命科學探索的重要科研項目在醫藥開發、科學研究、醫學及臨床研究，疾病分子標志物篩選、生命和神經發育研究等提供多層次、多組學檢測服務和解決方案，助力300+CNS國際學術期刊文章發表，30+篇單細胞技術聯合（助力）發文，IF 10+文章占比＞65%。杭州BD單細胞轉錄組測序截至2022年6月，烈冰助力發表單細胞測序文章30+篇。

單細胞測序方法不但改進了實驗過程，還幫助科學家在健康和疾病研究的關鍵領域取得新進展。那些過去從轉錄平均值或單項參數讀取中無法獲得的新發現正在改變我們對傳染病、神經退行性疾病等疾病的認識。從鑒定新的細胞類型和狀態，到揭開疾病用藥應答和耐藥的潛在機制，單細胞測序正在推動突破性的研究，有望改變生物學和醫療。無論是無法解釋的疾病，還是人體或自然界中尚未探索的系統，曾經模糊的東西正變得越來越清晰。隨著我們邁向科學的未來，我們手頭的工具就像伽利略的望遠鏡一樣能夠提高焦距和放大倍數，而定義科學未來的知識新深度是十年前的人們所無法想象的。

什么時候要用到去死細胞的操作呢？跟進烈冰生物多年單細胞測序服務經驗來看，當細胞懸液進行質量和活性檢測后，考慮對細胞活性在50%-70%的懸液進行去除死細胞的操作。而太低活性的懸液（小于30%），懸液中細胞大量死亡，可能已經丟失了原組織內的細胞比例和狀態，失真嚴重，建議重新收集樣本進行新的實驗，保證數據的高質量和實驗結果的準確性。但需要注意到，去除死細胞的操作會損失一定的細胞數量，因此希望您在提供樣本時，盡可能提供足量的細胞，以備實驗過程中可能存在的細胞死亡的問題，BD Rhapsody單細胞捕獲平臺對樣本起始細胞量的要求較低，一般提供10萬個細胞以上均可滿足需求，特殊樣本可詳細咨詢烈冰生物。BD平臺基于cyto-seq技術，實現細胞和磁珠的一對一結合。

機體為響應各種應激，其細胞會從一種功能“狀態”轉變為另一種功能“狀態”；當細胞在不同狀態之間轉變時，往往會經歷轉錄重組，導致一些基因被沉默，一些基因被重新“喚醒”，但純化這些瞬態細胞進行研究是很困難或不可能的；scRNA-seq擬時序分析可以讓我們在不需要純化的情況下查看這些細胞狀態。擬時序分析，即根據不同細胞亞群基因表達量隨時間的變化情況，構建細胞譜系發育，但這里的時間并不是真時間，而是一個虛擬的時間，是指的細胞與細胞之間的轉化和演替的順序和軌跡。即使在同一個樣本中，也會存在多種不同的細胞形態。因此，不論測定了多少樣本，我們都可以采用擬時序分析對樣本中的細胞轉化和變化進行描述。烈冰專注單細胞多組學測序領域。武漢single cell 單細胞服務機構

單細胞測序平臺，烈冰提供高性價比服務方案。烈冰單細胞測序

對于稀有樣本，或細胞量比較少的稀有組織，樣本中每一粒細胞都很珍貴，BD Rhapsody單細胞捕獲平臺對該種類型的樣本能實現友好包容，如果在實際實驗中，我們發現因為樣本類型和制備單細胞懸液方法的不同，容易出現單細胞懸液中死亡細胞的比例較高的情況。也會和您探討是否考慮去除單細胞懸液中的死細胞和其他污染物的操作，以獲得高質量數據是至關重要的。這是因為，死亡的細胞易裂解導致其中的RNA釋放出來。這種cell-free RNA會導致檢測的背景噪聲，并會影響單細胞數據的質量。因此當樣本活性較差時，對細胞懸液中細胞活性檢測后，需要進行一般死細胞去除的工作（一般懸液活性小于70%時考慮此操作），以保證較高的上機捕獲細胞的質量。烈冰單細胞測序

上海烈冰生物醫藥科技有限公司致力于醫藥健康，是一家服務型的公司。公司業務涵蓋單細胞測序，生物大數據云分析平臺，空間轉錄組測序，單細胞多組學測序等，價格合理，品質有保證。公司秉持誠信為本的經營理念，在醫藥健康深耕多年，以技術為先導，以自主產品為重點，發揮人才優勢，打造醫藥健康良好品牌。在社會各界的鼎力支持下，持續創新，不斷鑄造***服務體驗，為客戶成功提供堅實有力的支持。