單細胞RNA-seq、RNA-seq和逆轉錄qPCR（RT-qPCR）都采用一個共同過程，即分離RNA并將其轉化為cDNA進行分析。不過，每種分析在開展方式和獲得的數據上有所不同。RNA-seq和RT-qPCR都是先從大量細胞中分離RNA，然后將其轉化為cDNA。RNA-seq是使用cDNA來構建新一代測序文庫，從而測定整個轉錄組的基因表達。RT-qPCR則是從cDNA中擴增特定靶點，并通過熒光測定表達水平。RT-qPCR限于已知靶點，而RNA-seq可實現無偏倚的全轉錄組基因表達分析。然而，這兩者只能提供細胞群體內基因表達的平均情況。單細胞RNA-seq則在分離RNA之前將單細胞分離到微孔或單個微反應容器中。然后用細胞特異性的條形碼標記RNA，確保來自每個細胞的cDNA可以追溯到起源細胞。與RNA-seq相似，帶有條形碼的cDNA也被用于構建新一代測序文庫，從而能夠對每個細胞的整個轉錄組進行基因表達測定。十二年測序經驗，烈冰生物單細胞多組學領域的佼佼者。廣州10X Chromium X單細胞測序百萬通量平臺

單細胞獲得困難，不同組織要求不盡相同難以搞定？烈冰2000+項目消化經驗，100+組織類型解離protocol，精心設計不同組織實驗的解離、細胞懸浮實驗體系，確保單細胞的獲得。凍存樣本無法實驗，珍貴樣本無法使用？烈冰采用國際認可的凍存組織復蘇技術以及死細胞過濾技術，確保凍存組織使用。珍貴樣本，細胞數量太少，消化背景雜無法做單細胞？采用國際認可的10XGenomics，BDRhapsody雙平臺模式，根據樣本實際情況和用戶需求提供客觀有效的實驗方案,細胞量少，背景雜也能做單細胞。單細胞RNA分類精度不足，部分細胞無法細分？烈冰同時采用單細胞蛋白質組與單細胞轉錄組測序技術，真正做到從上游到下游的全流程檢測，確保超高的細胞分類精度。長春上海烈冰單細胞測序全線搭建10x Genomics單細胞測序平臺。

10XGenomics和Drop-Seq具有類似的技術原理。從橫向孔道中逐一輸入凝膠微珠，一列縱向孔道輸入細胞，凝膠微珠與細胞碰撞后會吸附在凝膠微珠上，并通過微流控技術，將之輸入到第二縱向孔道，即油相孔道中。這時候，就形成了一個個油滴并輸出并收集在EP管中。每一個油滴中會落入一個細胞以及一個凝膠微珠，那么在每一個凝膠微珠中上長滿了不同的CellBarcode和UMIBarcode連接形成的序列，再加上一端PolyT的抓手，構成我們的捕獲凝膠微珠。而這個凝膠微珠抓手就會使用oligodT抓住mRNA構建文庫。

烈冰與國內高校、研究所、醫院和藥企單位開展深度合作，服務于600+臨床與研究機構，1000+客戶和5000+重要科研項目，助力并聯合發表300+篇CNS等國際學術期刊（不完全統計），在單細胞領域，烈冰助力用戶發表單細胞文獻30+篇，總IF＞300+，IF＞10+以上文章占比65%以上，包含Immunity、NatureCellBiology、NaturePlants、AdvancedScience等生物領域國際主流學術期刊，已發表文章研究領域涵蓋包括COVID-19研究、疾病發生轉移機制，免疫研究、腦神經、白血病、胚胎發育、糖尿病、退行性疾病和植物領域研究等。十二年測序經驗，累計服務與5000余項重要科研項目。

關于10XGenomics單細胞平臺的樣本類型和樣本制備：10X平臺在上機前需要注意細胞消化后的細胞團塊，獲得分離良好的細胞懸液、無細胞隨便、極少的細胞團塊，且細胞活力高（＞70%）；此外，了解您所研究細胞的大小范圍也很重要。細胞大小通常與細胞表達的轉錄本數量有關。各種尺寸不同的細胞（一般直徑不大于50μm）均可與我們基因表達解決方案中使用的10XGenomics平臺兼容。一般來說，細胞制備方案將根據組織來源和細胞類型而變化。每種組織類型都是獨特的，因此，必須在開始任何單細胞實驗之前優化樣本制備，烈冰多年樣本解離消化經驗，累積10+物種、50+組織的消化protocol，若您的樣本為組織，且尚未成功將組織樣本消化成單細胞懸液，烈冰將盡可能提供技術及實驗上的幫助。單細胞測序是高通量測序下的又一重大技術突破。武漢10X Chromium X單細胞測序服務機構

單細胞多組學測序可識別重要的轉錄因子，進行譜系和發育追蹤。廣州10X Chromium X單細胞測序百萬通量平臺

單細胞轉錄組測序是在單細胞水平上高通量測序分析基因表達譜的技術，突破傳統高通量測序的局限性，組織解離后，單個樣本一次上機能捕獲500-20000個細胞，基于每個細胞分別建庫測序，獲得單個細胞的基因結構和基因表達狀態，并鑒定細胞的類型，可以在不同樣本間從細胞類型的組成和豐度角度進行比較，反映細胞間的異質性。而2021年橫空出世的10XGenomicsChromiumX平臺實現了單塊chip上的百萬級別通量的細胞捕獲，系統實現16個通道同時運行，每個通道可捕獲2000-20000個細胞（不混樣），并支持原ChromiumController體統外的多種細胞捕獲百萬級別通量實驗，可準確鑒別稀有細胞類型和適配大規模單細胞研究。廣州10X Chromium X單細胞測序百萬通量平臺

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