Agilent 甲基化芯片通過SurePrint芯片合成**技術，結合優化的探針設計及實驗方法，可靈活進行甲基化研究，得到高靈敏度、高特異性、高重復性的結果。技術流程：1.將基因組DNA超聲打斷成400-500bpDN**段；2.加熱變性并將變性后的單鏈DNA樣品分成兩份；3.其中一份單鏈DNA樣品加入抗5'-甲基化胞嘧啶核苷抗體。使用免疫磁珠法分離樣品中甲基化DN**段的抗體復合物，樣品中其余的非甲基化DN**段被洗脫；4.純化免疫共沉淀的DN**段；對MeDIP(Cy5)與Input(Cy3)樣品分別進行標記；5.標記后的MeDIP與Input樣品混合、變性，與芯片雜交；6.檢測雜交信號并進行數據分析。芯片數據如何與二代、三代數據整合。北京oxBSDNA甲基化方案

焦磷酸測序（Pyrosequencing）技術服務基于QIAGEN公司的PyroMarkQ96ID平臺，能提供基于序列測定的SNP檢測、等位基因頻率分析和甲基化檢測，雜合子缺失及細菌和病毒分型等技術服務。優勢：得到定量序列結果的技術，極高的準確性，重現性**，實驗設計靈活。應用：可以用于任何遺傳多態性的分析甲基化研究的平臺通量、低成本的快速臨床微生物診斷。報告模板：1材料1.1試劑與試劑盒1.2儀器2方法2.1DNA抽提2.1甲基化修飾2.2純化亞硫酸鹽修飾的DNA2.3甲基化PCR2.4Pyrosequencing檢測。遼寧850K芯片DNA甲基化售后分析云生物提供測序服務。

誘導染色體不穩定性：**細胞中基因組總體甲基化水平的降低，導致高頻率的染色體重組或雜合性丟失（lossofheterozygosis,LOH），使得基因組不穩定性增加，Science與2003年刊登的3篇論著認為這可能是導致**發生的原因之一。DNA甲基化導致基因突變：基因突變普遍存在于生物體細胞中，但在正常情況下，基因突變發生的頻率非常低，而在**細胞中，基因突變發生的頻率**提高。**細胞中由于DNA甲基化的位點多在CpG島5'胞嘧啶，甲基化的5-mCpG二核苷酸中的5-mC能以較高的速率脫氨基轉換成T，所以該位點是基因突變的常見位點。

芯片平臺作為目前比較成熟的篩選工具，已經在很多領域有了相應的應用。多家芯片公司在DNA甲基化這塊兒有了相應的產品提供，其中應用**為***的就Agilent平臺和Illumina平臺，相應的產品包括Agilent Human CpG Island Microarray Kit，Infinium HumanMethylation27 BeadChip和Infinium HumanMethylation450K BeadChip。另外Roche NimbleGen和Affymetrix也有相應的芯片推出，但是NimbleGen的芯片今年下半年已經停產不同的芯片平臺，各自的實驗過程也是不一樣的。安捷倫前期采用的甲基化DNA免疫共沉淀（MeDIP）技術。將基因組DNA分成兩份，一份用來做 MeDIP，另一份作為對照。兩個樣品都標記熒光(富集的樣品用Cy5標記，對照用Cy3標記)，然后與芯片雜交。芯片上每個探針的Cy5/Cy3強度比例顯示出該區域的甲基化程度。WGBS和RRBS都是金標準技術, CNS發表文章都很多，廣發被接受。

甲基化研究項目各學科細分分析：從各學科細類中標金額和中標數量分析，**學依然是甲基化研究的熱點方向，該方向總計中標金額2217萬元，中標數量57項。其它細分學科包括預防醫學、遺傳學與生物信息學、檢驗醫學也占有不少份額。甲基化研究項目各單位中標情況分析：經過整理，甲基化項目類中標單位共105家單位，按中標項目金額排列如下（截取部分超過百萬的項目）。甲基化研究方向細分熱點分析："游離DNA甲基化"、"m6A-RNA甲基化"，“羥甲基化”等均是甲基化研究方向的重點關注內容。尤其值得關注的是m6A相關研究近年來呈直線上升態勢，成為國自然的熱點。TBS具有高深度、定量、高準確性 。遼寧850K芯片DNA甲基化售后分析

DNA甲基化作為表觀遺傳學研究的重要范疇。北京oxBSDNA甲基化方案

焦磷酸測序(Pyrosequencing)：隨著技術的不斷改進，現在認為焦磷酸測序技術（Pyrosequencing）是甲基化檢測新的金標準。焦磷酸測序作為一種新的序列分析技術，能夠快速地檢測甲基化的頻率，對樣品中的甲基化位點進行定性及定量檢測，為甲基化研究提供了新的途徑。在序列延伸過程中，根據C和T的摻入量來定量確定單個位點的C-T比例。因此，不同位點的甲基化變異就能被準確檢測，并給出精確的甲基化程度的數據。QIAGEN公司在焦磷酸測序的應用上具有明顯的優勢，目前提供三種焦磷酸測序儀器，通量由低到高，適合不同的應用。PyroMark Q24 的強項在于可對多達24個樣品進行焦磷酸測序。需要大樣品量的應用更適合在PyroMark Q96 ID 上進行。在考慮到處理成百上千個樣品所需的大量試劑時，運行通量**化可能會使實驗成本變得很高。而PyroMark Q96 MD裝有一臺高度靈敏的光檢測攝像頭，可以在減少試劑量的情況下對少量的DNA模板進行準確測序。這些不同平臺的推出，對于我們實際研究提供了更有效的檢測手段。北京oxBSDNA甲基化方案