安捷倫公司芯片平臺因其強大的eArray探針設(shè)計平臺，可以進行芯片的定制。在甲基化領(lǐng)域同樣適用。合作伙伴利用Agilent芯片平臺設(shè)計了一款專門針對**啟動子區(qū)域CpG島的甲基化芯片。絕大多數(shù)基因是針對基因的啟動子區(qū)域的CpG島設(shè)計探針。這款芯片上一共有4160個功能注釋比較明確的基因，其中2128個和**發(fā)生有關(guān)系。從功能上分，有256基因和細胞凋亡有關(guān)，1273個基因和信號傳導(dǎo)有關(guān)，487個基因和壓力和衰老有關(guān)。采用的是8*60K的芯片格式。利用MeDIP原理進行甲基化檢測的方法探針的分辨率可以精確到100 bp。羥甲基化DNA免疫沉淀測序是通過5hmC特異性抗體富集結(jié)合高通量測序技術(shù)。山東RIP-seq技術(shù)服務(wù)怎么樣

GOS2基因靶向甲基化測序確定了一種快速復(fù)發(fā)、常規(guī)致死的腎上腺皮質(zhì)*亞型

Targeted Assessment of G0S2

Methylation Identifies a Rapidly Recurrent, Routinely Fatal Molecular Subtype

of Adrenocortical Carcinoma. Clin Cancer Res. 2019; 25(11):3276-3288.

(IF= 10.199)

研究者分析了ACC-TCGA數(shù)據(jù)，在114例腎上腺皮質(zhì)**的**隊列中鑒定了一個在CIMP高ACC中***被高甲基化并沉默的基因G0S2，并通過高通量BSP得到驗證。G0S2基因CpG島高甲基化**預(yù)測不良臨床后果，是ACC快速復(fù)發(fā)或致死的標志。評估G0S2甲基化對臨床決策是直接可行的，并有助于對侵襲性ACC進行有效輔助***。 山東RIP-seq技術(shù)服務(wù)怎么樣cfDNA，cell free DNA，就是血液中游離的自身DNA。

    cfDNABS-Seq送樣要求一、送樣類型分離好的血漿二、保存方式分離后的血漿，用ml離心管分裝，例如：1ml/管；放-20℃冰箱中保存（短暫保存，1-2周）；放-80℃冰箱中長期保存(1年以內(nèi))；保存期間不能凍融。三、運輸條件干冰運輸：順豐陸運（3-4天時間），夏季10-15公斤干冰；秋冬季10公斤干冰。四、抽血要求1、使用Streck**管（不建議使用普通的EDTA-鈉抗凝管），采集10ml外周靜脈血（客戶沒有Streck**管，公司配送）；2、室溫或者放置4℃冰箱中半小時以上，不超過8小時，進行血漿分離步驟。五、血漿分離步驟1、4℃條件下以1600g離心10min，離心后將上清（血漿）分裝到2、4℃條件下以16000g離心10min去除殘余細胞，將上清移入新的離心管中，每管分裝1ml;3、血漿樣本存放于-80℃冰箱中保存;使用干冰運輸,提取之前不能凍融。備注1：血漿分離在4℃條件進行，如果客戶沒有冷凍離心機，也可以在室溫條件下進行；備注2：離心后取血漿上清，避免吸取白細胞；通常10ml全血可以獲得4-5ml血漿。

甲基化敏感性高分辨率熔解曲線分析(MS-HRM)

通過熔解曲線分析可以將單堿基序列的差異轉(zhuǎn)變成熔解曲線的差異，因此DNA樣本經(jīng)過亞硫酸氫鹽處理后，甲基化與未甲基化DNA會存在序列差異，這種差異可通過熔解曲線分析來發(fā)現(xiàn)。使用該方法進行甲基化分析*需一對引物，相對簡單，不過這種方法對儀器的要求頗高，需要帶HRM模塊的熒光定量PCR儀，并且在進行實時定量PCR過程中，需要使用飽和的熒光染料。利用MS-HRM技術(shù)進行甲基化檢測只能對檢測片段整體甲基化情況進行分析，并不能明確每個CpG位點的甲基化狀態(tài)。因此這種技術(shù)適用于大量樣本的檢測，篩選出感興趣的CPG位點，然后利用其他方法進行單個位點的精確檢測及甲基化程度的精確定量。 WGBS用于人、哺乳動物及農(nóng)林牧漁方向的高水平甲基化研究。

    2019國自然基金解析—甲基化研究專題。從生命科學(xué)部和醫(yī)學(xué)科學(xué)部總體來看：2019年度，生命科學(xué)部獲自然科學(xué)基金委批準資助6478項（不含杰出青年基金項目），批準資助金額共計，單項平均資助金額。2019年度，醫(yī)學(xué)科學(xué)部共批資助10138項（不含杰出青年基金項目），批準資助金額共計，單項平均資助金額。從甲基化研究方向來看，與甲基化研究相關(guān)的項目總數(shù)達283項，項目總金額超過12669萬元。其中生命科學(xué)部項目總數(shù)62項，項目金額3235萬元，醫(yī)學(xué)科學(xué)部項目總數(shù)221項，項目金額9434萬元。從2011-2019年甲基化研究方向的項目金額和項目數(shù)目分析，整體呈上升趨勢；從醫(yī)學(xué)科學(xué)部來看，甲基化研究項目獲批數(shù)量221項，項目金額達到9434萬，較之2018年度項目獲批金額（7166萬元）上升趨勢尤為明顯，可以看出，甲基化研究日益成為國自然的研究熱點。 高通量BSP測序結(jié)果多種展示形式。山東RIP-seq技術(shù)服務(wù)怎么樣

云生物提供測序服務(wù)。山東RIP-seq技術(shù)服務(wù)怎么樣

Chip-Seq 是指通過染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChIP）特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DN**段，并對其進行純化和文庫構(gòu)建；然后對富集得到的DN**段進行高通量測序，通過將獲得的數(shù)百萬條序列標簽精確定位到基因組上，從而獲得全基因組范圍內(nèi)與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等互作的 DNA 區(qū)段信息，是目前在全基因組水平研究蛋白結(jié)合靶DNA序列的重要手段，為轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白修飾、核小體定位等表觀遺傳學(xué)的研究提供有效方法。

應(yīng)用領(lǐng)域

1、確定組蛋白修飾的位置及其與基因表達的關(guān)系。

2、完成對轉(zhuǎn)錄因子及其它蛋白在基因組上結(jié)合位點的精細定位。

3、研究特定的核小體或組蛋白的分布。 山東RIP-seq技術(shù)服務(wù)怎么樣