接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！哪家有GMP等級的PEI轉染試劑？天津PEI轉染試劑價格多少

穩定轉染方法：

1.接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。

2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。

4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。

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上海曼博生物醫藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫藥科技服務，以創新和為價值理念，通過自身研發團隊，以及與國內外專業科研團隊強強聯合，不斷創新，為生命科學和醫藥研發行業提供產品和服務。生物醫學工程是綜合應用生命科學與工程科學的原理和方法，從工程學角度在分子、細胞、組織、乃至整個人體系統多層次認識人體的結構、功能和其他生命現象，研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛生保健的人工材料、制品、裝置和系統技術的總稱。

細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中常規的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法：生物轉染，物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體，以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見，其侵染效率可以達到90%以上，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設備，且一分錢一分貨，性能好的價格也都相對較高。更多關于PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！哪個品牌的GMP等級的PEI轉染試劑比較好用？

上海曼博生物醫藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫藥科技服務，以創新和為價值理念，通過自身研發團隊，以及與國內外專業科研團隊強強聯合，不斷創新，為生命科學和醫藥研發行業提供產品和服務。生物醫學工程是綜合應用生命科學與工程科學的原理和方法，從工程學角度在分子、細胞、組織、乃至整個人體系統多層次認識人體的結構、功能和其他生命現象，研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛生保健的人工材料、制品、裝置和系統技術的總稱。更多關于PEI相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！25K和40K的PEI轉染試劑有哪些區別？RNAPEI轉染試劑蛋白產量

PEI轉染試劑會不會有毒性呢？天津PEI轉染試劑價格多少

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上海曼博生物醫藥科技有限公司是一家集生產科研、加工、銷售為一體的****，公司成立于2019-02-15，位于自由貿易試驗區達爾文路16幢104室。公司誠實守信，真誠為客戶提供服務。公司主要經營血小板裂解液，WB自動孵育系統，微流控器官芯片，藍牙無線標簽機，公司與血小板裂解液，WB自動孵育系統，微流控器官芯片，藍牙無線標簽機行業內多家研究中心、機構保持合作關系，共同交流、探討技術更新。通過科學管理、產品研發來提高公司競爭力。PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote嚴格按照行業標準進行生產研發，產品在按照行業標準測試完成后，通過質檢部門檢測后推出。我們通過全新的管理模式和周到的服務，用心服務于客戶。上海曼博生物醫藥科技有限公司依托多年來完善的服務經驗、良好的服務隊伍、完善的服務網絡和強大的合作伙伴，目前已經得到醫藥健康行業內客戶認可和支持，并贏得長期合作伙伴的信賴。