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支鏈PEI轉染試劑使用說明

來源: 發布時間:2023-08-05

注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑時出現沉淀什么原因?支鏈PEI轉染試劑使用說明

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隨后,開拓了在病理(組織研究)應用產品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發染料和染色劑,以實現更好的樣品觀測方式。與government合作,開發了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家cancer中心合作,開發天然產物分離和純化產品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發出超順磁珠,用于DNA、蛋白質和肽的研究。Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用,并不斷開發和增強其性能。近期業務擴展到電子產品,Polysciences的精密微粒子產品拓展了納米技術應用中測量精度。公司秉承為應用而研發,目前已擁有超過3000種產品。上海曼博生物為Polysciences官方授權du jia代理商,更多產品信息,歡迎咨詢!RNAPEI轉染試劑使用注意事項Polysciences轉染試劑怎么樣?

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材料:質粒DNA指數生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃備用。1×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃備用。方法:1.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上(根據實驗需要選擇培養皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90%)。根據細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到宜轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優化。哪家有GMP等級的PEI轉染試劑?

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細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中常規的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都相對較高。更多關于PEI轉染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!哪個品牌的GMP等級的PEI轉染試劑比較好?MirusPEI轉染試劑價格

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