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人血小板裂解液常見問題

來源: 發(fā)布時間:2025-04-21

   血小板裂解液(plateletlysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetalbovineserum,F(xiàn)BS)的替代品,應用于間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells,MSC)的大規(guī)模擴增培養(yǎng)。但是,PL對諸如牙髓干細胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)、牙周膜干細胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)及根尖牙rutou干細胞(stemcellsfromapicalpapilla,SCAP)等牙源性干細胞的生物學效應尚不明確。血小板裂解液里的沉淀會對實驗有影響嗎?人血小板裂解液常見問題

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使用胎牛血清(FBS)和MSC的離體擴增其他動物衍生的已氣餒由監(jiān)管機構,以減少發(fā)送朊病毒和其他動物傳染病的危險,并且避免在所述異種免疫反應主辦。然而,由于缺乏FBS制劑標準化導致細胞培養(yǎng)性能不一致性和FBS生產(chǎn)已經(jīng)到來,因為動物福利問題很初提出血小板裂解液(PL)作為動物血清的替代物,用于由Doucet等人體外擴增MSC。包含在PL的生物活性分子和生長因子支持的MSC從骨髓(BM)導出的膨脹,臍帶血(UCB),和脂肪組織(AT),與FBS相比顯示出有利的結(jié)果。此外,間充質(zhì)干擴大了與PL-富集介質(zhì)已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病(GVHD)造血干細胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者,主要是中度至重度的膝關節(jié)骨性關節(jié)炎。


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為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結(jié)果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結(jié)論一致。


通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時,分化成脂細胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導的負面影響較為明顯。基于上述結(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應結(jié)合自己的實驗條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。更多關于Sexton血小板裂解液相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!血清替代物的主要成分是什么?

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本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。美國Sexton的血小板裂解液的血小板來源于美國FDA注冊、AABB認證的美國血庫。單位必須在過期前接受異體輸血。血小板捐獻者接受捐贈前進行徹底篩查和檢測,以降低輸血傳播ganran的風險,根據(jù)21CFR610和AABB血庫和輸血服務標準。血清替代物的有效成分是什么?美國血小板裂解液斷貨

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美國Sexton無動物源無需添加肝素人血小板裂解液已被上百篇文獻報道了美國Sexton公司的血小板裂解液為間充質(zhì)干細胞MSCs以及CAR-T/NK細胞擴增的良好的細胞培養(yǎng)補充劑,根據(jù)用戶科研和臨床以及GMP生產(chǎn)需求,提供臨床或研究級配方,同時滿足質(zhì)量和監(jiān)管要求,在FDA已經(jīng)備案藥物主文件BMF,在全球臨床干細胞和免疫tumour學應用中用作高性能FBS替代品,主要特點如下:兼容性:作為培養(yǎng)基補充劑,替代胎牛血清FBS或AB血清,適用于guangfan的細胞類型包括MSCs,T細胞,NK細胞,內(nèi)皮細胞等的培養(yǎng)。安全性:在ISO9001認證的設施中驗證了病原體的減少,并進行了無菌,支原體和內(nèi)dusu等測試重現(xiàn)性:通過匯集來自AABB認證/FDA注冊血液中心的100多名美國人體捐獻者,比較大限度地減少了批與批之間的差異可靠性:AABB認證/FDA注冊官方認證血源合規(guī)性:在歐洲藥典5.2.12.4章則要求的環(huán)境下生產(chǎn),獲FDABMF認證無需肝素:產(chǎn)品生產(chǎn)過程和使用過程都無需添加肝素易于使用:直接按比例添加入培養(yǎng)基,可選規(guī)格100ml和500ml穩(wěn)定供應:國內(nèi)長期現(xiàn)貨,滿足臨床以及大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)需求。更多Sexton血清替代相關產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號Mine-bio查看更多產(chǎn)品文章:人血小板裂解液常見問題

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