基于慢病毒載體的體外基因zhi liao已在臨床試驗中取得良好的效果,有望zhi yu一些造血系統的單基因遺傳病。通過提高靶細胞轉導效率和減少轉導中病毒載體量,基因zhi liao有效性、安全性和成本都可以得到改善。不同包膜糖蛋白偽型慢病毒載體通過與細胞膜表面的不同受體結合,促進病毒黏附和入胞,增強不同靶細胞的病毒轉導效率。此外病毒轉導增強劑可以在病毒進入細胞過程或進入后發揮作用,在提高轉導效率的同時使靶轉導基因在體內長期穩定表達。什么試劑可以增強慢病毒轉導的效率?慢病毒轉導實驗
影響轉導效率的另一個關鍵參數是ganran復數(MOI),MOI指的是每個細胞ganran的病毒粒子個數,病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細胞類型的不同而不同,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,ganran效率越高,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,也說明細胞越難被轉導。SIRIONBiotech為研究機構和醫院開發了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應條件。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多關于Sirion相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio淺談慢病毒轉導試劑盒國產和進口的慢病毒轉導增強劑哪個好呢?
聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉錄病毒的轉導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉導。在增強各種細胞的慢病毒轉導中,轉導效率隨polybrene濃度的增加而增加。但轉導增強的同時也會對細胞產生一定毒性作用,polybrene不僅對細胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會不同程度的影響各類細胞的生長潛力。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
研究發現 LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產生比polybrene更高的轉導效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉導效率的潛力。細胞狀態對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響,良好的生長狀態是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態較好、輪廓清晰、處于對數生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。更多關于慢病毒轉導相關問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章:Mine-bio國內做慢病毒轉導增強劑的公司。
為了達到研究目的,在轉導過程中加入轉導增強劑也能有效提高轉導效率。目前根據轉導增強劑的作用機制可分為兩大類:入胞增強子和入胞后增強子。入胞增強子作用于病毒的附著或進入過程,通過在物理上增加病毒載體顆粒和靶細胞之間的共定位或降低它們之間的排斥力發揮作用。而入胞后增強子是在病毒進入細胞后發揮作用,降低細胞質中運輸阻礙,Zui終獲得更高的轉導細胞比例并提高細胞內VCN。基因zhi liao的臨床效果取決于細胞的高水平轉導,雖可通過二次轉導或提高gan ran復數(multiplicityofinfection,MOI)增加轉導率,但延長體外培養時間可誘導干細胞進入細胞周期而影響其分化增殖能力;提高gan ran復數會提高插入突變風險和增加生產成本。慢病毒轉導增強劑是什么呢?lentiBOOST慢病毒轉導方案
新合成的逆轉錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。慢病毒轉導實驗
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉導效率。SIRION Biotech 為研究機構和醫院開發了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發,以及評估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!更多技術文章可關注公眾號:Mine-bio慢病毒轉導實驗