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研究級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-09

研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)技術(shù)文章,歡迎咨詢上海曼博生物!也可關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio有關(guān)慢病毒導(dǎo)染的臨床案例。研究級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

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陽(yáng)離子聚合物的硫酸魚精蛋白(PS)Zui早被美國(guó)食品和藥物管理局批準(zhǔn)用于zhi liao肝素過量。1989年,Cornetta和Andersonshou ci提出PS可作為聚凝胺的替代品用于增強(qiáng)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。在部分細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,PS在不影響細(xì)胞增殖或分化潛能下使轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提高1倍,因此聚凝胺在基因zhi liao中的地位逐漸被取代。但PS不能增強(qiáng)慢病毒介導(dǎo)的原代小鼠T細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo),對(duì)人CD34+外周血干細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響也很小,從而限制了它在一些基因zhi liao中的應(yīng)用。此外,PS作為較早使用的增強(qiáng)劑之一,也常用于評(píng)定其他轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑效果的聯(lián)合測(cè)試。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率哪種試劑可以幫助增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)呢?

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人間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長(zhǎng)期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類CD34+HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。這里,我們研究了這些試劑用于脂肪來源MSC細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增qiang xiao果。我們發(fā)現(xiàn)LentiBOOST和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生與polybrene相當(dāng)甚至更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中MSCs慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。

Sirion Biotech GmbH 公司于2007年在德國(guó)馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應(yīng)的模式。Sirion載體被用于基因功能研究、臨床前靶點(diǎn)驗(yàn)證、基因zhi liao和疫苗開發(fā)。Sirion Technologies獲得了歐洲和美國(guó)幾項(xiàng)主要臨床試驗(yàn)(Phase I/II/III)的許可,是歐洲主要的病毒載體技術(shù)商業(yè)供應(yīng)商,在短時(shí)間內(nèi)可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個(gè)性化項(xiàng)目管理服務(wù)。LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。更多技術(shù)文章歡迎關(guān)注曼博生物公眾號(hào):Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)染相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。

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Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對(duì)于細(xì)胞增殖無不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果。可減少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會(huì)過度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對(duì)ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國(guó)區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國(guó)市場(chǎng)的營(yíng)銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。慢病毒轉(zhuǎn)染可以使用哪些試劑呢?T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)

新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中稱為原病毒。研究級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個(gè)細(xì)胞ganran的病毒粒子個(gè)數(shù),病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同,因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,ganran效率越高,但對(duì)細(xì)胞的毒性也越大。另外細(xì)胞需要的MOI值越大,也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo)。SIRIONBiotech為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的GMP材料供應(yīng)條件。LentiBOOST目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。更多產(chǎn)品信息歡迎咨詢上海曼博生物,也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)查看更多技術(shù)文章:Mine-bio研究級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

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