經常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養之前有必要花時間來優化下這個肝素濃度參數嗎?現在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養基中培養MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
血小板裂解液的制血方法是什么?Elitecell血小板裂解液肝素怎么加
本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業規模(很小批量為20L)生產的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養,與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養基進行比較。在所有實驗中,每天都監測細胞,每次傳代結束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數器計數然后繼續傳代。更多關于血小板裂解液的相關信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章!
達優血小板裂解液作用原理血小板裂解物是無菌過濾的黃色澄清溶液,來自于多人份健康人血小板,裂解后經無菌過濾制備而成。
血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長因子等細胞培養必須物質,在體外細胞培養和細胞zhiliao中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來源血小板細胞經過連續的反復凍融裂解后,進一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經細胞裂解后的產物,已經被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的替代品,應用于間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規模擴增培養。 更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
血小板裂解液解凍后請立即進行培養基的配制,配置好的培養基在2-8°C環境下保存并盡快使用,不建議超過21天。如解凍后的原瓶無法全部使用,建議按需分裝成合適的小瓶中進行-20°C保存一旦產品瓶或袋經過初始解凍過程,建議盡快將產品置于基礎培養基中。盡管對于儲存在2-8°C的準備好的含有hPL的培養基,Sexton的內部測試有效期為21天,但建議客戶進行內部驗證研究,以確定其基于血小板裂解液的完整培養基的有效期。使用的基礎培養基和添加劑等變量可能會縮短或延長完整培養基產品的有效期。GMP級血小板裂解液產品在嚴格的GMP條件下生產和分裝。
血小板裂解液作為胎牛血清的替代品,間充質干細胞/基質細胞(MSCs)被定義為自我更新的多能祖細胞,能夠分化成中胚層來源的其他細胞類型,如脂肪細胞,骨細胞和軟骨細胞。人源血小板裂解液是無動物源血清培養補充劑,能在細胞培養時提供細胞生長所需動力,目前已被大規模的使用在干細胞及原代細胞培養過程中。人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度,更用特殊工藝去除了細胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性。 更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!血小板裂解物是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細胞生長因子。Sigma血小板裂解液怎么使用
GMP級血小板裂解物產品在嚴格的GMP條件下生產和分裝。Elitecell血小板裂解液肝素怎么加
通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發現兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時,分化成脂細胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導的負面影響較為明顯。基于上述結果,我們現在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應結合自己的實驗條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應該在有效防止含血小板裂解液培養基凝膠形成的基礎上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。更多關于Sexton血小板裂解液相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!Elitecell血小板裂解液肝素怎么加