《CAR-T細胞治 療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》一文提到:目前RCR/RCL病毒檢測方法主要有指示細胞培養法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/q-PCR法(通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應)和轉錄酶活性測定法(PERT)等。其中,利用指示細胞培養法對生產過程中的病毒(上清液、病毒生產終末期細胞)存在的RCL進行培養擴增,并在培養終點進行重復檢測是FDA推薦的RCL檢測方法。
《CAR-T細胞治 療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》一文提到:目前RCR/RCL病毒檢測方法主要有指示細胞培養法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/q-PCR法(通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應)和轉錄酶活性測定法(PERT)等。其中,利用指示細胞培養法對生產過程中的病毒(上清液、病毒生產終末期細胞)存在的RCL進行培養擴增,并在培養終點進行重復檢測是FDA推薦的RCL檢測方法。 如何用qPCR法做復制型慢性毒檢測?深圳RCL病毒檢測價格
用qPCR法進行rcAAV復制型腺相關病毒檢測時,出現擴增效率超出標準要求(低于83.3%或高于110%)的原因有哪些?①設計的引物探針不適用:重新分析靶標序列進行設計。②標曲濃度設定太高,超出標曲線性范圍:對范圍進行驗證,選取合適標曲范圍。③人員操作問題,如稀釋錯誤、制備過程震蕩時間過長等:人員上崗前應接受多面培訓并做到熟練操作,考核合格后方可上崗。④移液器未校準或品質問題導致量取不準:定期對移液器進行校準并選擇好品質移液器。廣州復制型腺相關病毒檢測品牌復制型腺相關病毒檢測要求有哪些?
美國FDA2020年發布的關于RCR/RCL病毒檢測指南提出:對于RCR/RCL的檢測包含指示細胞培養法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/Q-PCR法(通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應)、PERT法(產物增強性逆轉錄檢測法)共4種檢測方法。其中,指示細胞培養法和Q-PCR法較常用,但各國監管機構推薦并且可以接受的方法還是以指示細胞培養法為準。由于細胞產品一般要新鮮輸注或快速凍存的特殊性,可使用Q-PCR法先進行質控放行,但指示細胞培養法應同時進行確認。
復制型病毒風險是評估病毒載體安全性的關鍵因素。評估分析基因突變和內源性 病毒片段重組產生復制型病毒的可能性,可有效避免出現與之相關的不良反應事件。南京正揚生物科技有限公司自主研發生產了針對不同復制缺陷型病毒載體的復制型病毒檢測試劑盒(qPCR法/RT-PCR法),可用于測試載體生產用主細胞庫、工作細胞庫、生產終末細胞、收獲的病毒上清和經病毒轉導后的細胞產品等,產品性能可靠、靈敏度高、操作便捷快速。歡迎您聯系正揚南京正揚有復制型逆轉錄病毒檢測試劑盒的裝量是多少?
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復制型腺相關病毒檢測適用性樣品有哪些?深圳RCL病毒檢測價格
用qPCR法進行rcAAV復制型腺相關病毒檢測時,出現擴增曲線復孔間熒光信號值降低及復孔間擴增曲線重復性差的原因可能是什么?復孔間部分曲線熒光信號值降低的現象比較常見,通常與反應管內存在氣泡相關,隨反應溫度升高,氣泡破裂導致熒光信號值降低。上機前需仔細檢查反應管內是否有氣泡殘留。另外,針對加樣誤差引起的復孔間重復性差,實驗人員上崗前需加強培訓并考核,移液器務必定期校準并正確掌握使用方法。此外,還需注意確保試劑與樣品混勻,離心后再上機。深圳RCL病毒檢測價格