體外培養環境中,細胞自身沒有抗污染的能力,即使培養基會添加抗 生素,抵抗污染的能力也很有限。常見的微生物污染為細菌、真 菌、支原體和病毒等,其中又以支原體污染蕞為普遍棘手。一旦污染了支原體的細胞將無法正常形成單克隆,而且細胞轉染過程容易死亡,細胞實驗效率極低。為了維持實驗的穩定,必須對所有的實驗使用到的細胞進行支原體檢測。南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的支原體檢測試劑盒,利用qPCR的原理進行支原體檢測,試劑盒具備操作簡便、檢測快速、靈敏度高等優點,是支原體檢測的優 選方法。南京正揚的支原體檢測試劑盒能提供性能驗證報告嗎?鄭州便捷支原體檢測試劑盒
qPCR法支原體檢測試劑盒的操作流程包括支原體DNA提取、qPCR試劑配制、qPCR加樣及上機檢測、結果分析四個環節。支原體DNA提取包含樣品前處理(離心分離上清等)、樣品裂解液消化、支原體DNA與磁珠結合、一次洗滌、二次洗滌、洗脫;qPCR試劑在配制時需先將試劑放置于室溫,避光放置30min,直至試劑融化,各個試劑組分混勻后按照說明書進行配制并分裝。在實驗室,注意分區操作,降低實驗發生污染的風險。用qPCR法進行支原體檢測時,出現擴增曲線異常的可能原因是什么?①如出現非特異性擴增現象,該問題是由反應管未蓋緊或密閉性差引起溶液蒸發而造成。上機前確保管蓋密閉,反應結束后查看八聯管或96孔板各管液面是否一致。與設備硬件相關,需咨詢硬件供應商解決。②如出現擴增曲線不平滑現象:可能與ROX加入量不足相關,個別設備有ROX校正功能,不同型號設備對ROX的需求量會有差異,需設置實驗摸索合適的ROX加入量。杭州支原體檢測中國藥典對支原體檢測的要求。
支原體污染后,細胞不會有明顯的死亡現象,且支原體通常能與細胞長期共存,培養體系亦無渾濁現象,然而實際上卻可能存在細胞形變,DNA合成受抑制等諸多問題,并且即使發現支原體污染也較難徹底清理,因此確保細胞在實驗初期無支原體污染是至關重要的。南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的支原體檢測試劑盒,利用qPCR的原理進行支原體檢測,試劑盒具備操作簡便、檢測快速、靈敏度高等優點,且符合中、美、日、歐國家要求,是支原體檢測的優 選方法。
我國藥典規定的支原體檢測方法為培養法和指示細胞染色法。但這些方法也存在一些不盡人意之處,如所需時間較長,有的操作復雜等。《中國藥典2020年版3301支原體檢測法》中指出:除培養法和DNA染色法外,也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法,對支原體進行檢測。由于支原體檢測存在必要性,如何盡可能提高檢測的準確率以及效率尤為關鍵。不少業內指導原則指出,支原體的核酸法檢測,通過嚴格且充分的方法學驗證,可以替代藥典中對的培養法與DNA染色法。細胞支原體污染用快速支原體檢測試劑盒。
南京正揚生科科技有限公司自主研發的支原體檢測試劑盒包括支原體DNA提取試劑盒(磁珠法)和支原體DNA檢測試劑盒(PCR-熒光探針法),支原體DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理,定性檢測主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批以及臨床治 療用細胞中是否有支原體污染。試劑盒設置有內參(IC),可對樣品提取至PCR擴增等實驗總流程進行監控,避免出現假陰性的情況。本試劑盒涵蓋120多種支原體DNA序列,操作便捷、檢測快速、專一性強、靈敏度高,可提供合規性能驗證報告。南京有哪些公司做支原體檢測試劑盒?杭州支原體檢測
細胞培養中支原體檢測的重要性。鄭州便捷支原體檢測試劑盒
南京正揚生科科技有限公司自主研發的支原體檢測試劑盒的優點有哪些?①操作簡單:樣品操作十分簡便,無需自配試劑,且樣品無需離心富集,節省大量時間;②樣品需求量少:只需500uL樣品進行前處理即可,無需進行樣品離心富集。③檢測用時較短:蕞快2h即可出結果,是CGT領域客戶的優 選;④合規驗證:整個檢測體系(包括提取和檢測)由全球蕞大第三方實驗室Eurofins權 威認證,驗證報告具備公正性、權 威性,符合中、美、日、歐申報要求;鄭州便捷支原體檢測試劑盒