南京正揚生物自主研發生產的宿主細胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理,提取純化生物制品中殘留的微量宿主細胞DNA/RNA,產品裝量為100reaction/盒,試劑組分包括樣品稀釋液、裂解液1、裂解結合液、磁珠懸浮液、洗滌液A、洗滌液B、洗脫液,裂解液1需放置于2-8℃儲存,其余組分均常溫儲存即可,切勿冷藏或冷凍。試劑盒有效期為12個月。在使用時,需自備金屬浴/水浴鍋、渦旋混勻器、掌上離心機、高速離心機等設備。
南京正揚生物自主研發生產的宿主細胞殘留核酸提取試劑盒利用磁珠法的原理,提取純化生物制品中殘留的微量宿主細胞DNA/RNA,產品使用事項包括以下幾點:1.磁珠懸浮液嚴禁冷凍和離心,以免損傷磁珠,磁珠使用前務必充分混勻。2.裂解液結合液、洗滌液A、洗滌液B在低于10℃時可能出現白色結晶,若出現沉淀,請37℃水浴重新溶解后使用。3.請盡量在完成樣本純化處理當天進行后續的DNA檢測,以保證檢測結果的準確性。4.請務必仔細閱讀本試劑盒說明書,并嚴格按照操作步驟完成操作。 宿主細胞殘留核酸提取試劑盒的用途。寧波病毒核酸提取優點
核酸提取時,加標回收率的定義及注意事項:加標回收率是指在測定樣品的同時,于同一樣品的子樣中加入一定量的標準物質進行測定,將其測定結果扣除樣品的測定值,以計算回收率。加標回收設置的注意事項:①同一樣品的子樣取樣體積必須相等;②各類子樣的測定過程必須按相同的操作步驟進行。③加標量不能過大,一般為待測物含量的0.5~2.0倍,且加標后的總含量不應超過方法的測定上限。④加標物的濃度宜較高,加標物的體積應很小,一般以不超過原始試樣體積的1%為好。寧波病毒核酸提取優點宿主細胞殘留核酸提取過程中有哪些因素會導致提取效果不佳?
南京正揚生物的宿主細胞殘留核酸提取試劑盒操作步驟包括實驗前準備、樣品準備、樣品消化、結合、洗滌、洗脫。產品第 一次使用之前需要向洗滌液A、洗滌液B中加入指定量的異丙醇,并在管子上做好標記。每次實驗前需準備適量的異丙醇,準備好2個溫浴溫度:56℃、70℃。樣品準備環節包括樣品稀釋、加標回收測試品準備、陰性對照(NCS)準備。每個待測樣品需做1份樣品原液提取、1份樣品加標回收測試,樣品加標回收的回收率能反映出樣品測試結果的真實性。中國藥典要求加標回收率在50%--100%。
磁珠法核酸提取裂解液的作用原理:磁珠法核酸提取是以納米生物磁珠為載體的一種新型核酸提取技術,核酸分子可與磁珠表面的硅羥基發生特異性識別與結合,在外部磁場的作用下發生聚集或分散,徹底擺脫傳統核酸提取過程中離心、抽取上清液等手工操作流程,從而實現核酸的自動化提取。廣泛應用于臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、分子生物學研究等多種領域。磁珠法核酸提取試劑盒一般包括裂解、結合、洗滌、洗脫四個主要步驟。核酸提取的質量要求。
磁珠法核酸提取過程中的常見誤區--洗滌次數越多,洗滌效果越好提取得到的核酸雜質過多時,使用者會考慮多進行幾次洗滌,以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數確實有利于提純核酸,但考慮到每次洗滌都會損失一定量的核酸,且增加了核酸斷裂水解的可能性,所以一般來說洗滌次數控制在2~4次為宜。商業化核酸提取試劑盒都是經過嚴格驗證的,在使用時嚴格按照說明書進行洗滌即可,隨意修改洗滌順序、洗滌磁珠、洗滌液的量,很可能會是核酸質量下降。磁珠法核酸提取原理。杭州宿主細胞殘留DNA提取
支原體核酸提取失敗的原因有哪些?寧波病毒核酸提取優點
磁珠法核酸提取的基本原理:首先,磁珠是一類特殊的納微米材料,它們的尺寸通常在零點幾微米到幾微米之間,只為一根頭發絲直徑的十幾分之一到幾十分之一,肉眼是無法觀測到單個磁珠的。其次,它們具有超順磁性,在磁場中可以向一側迅速移動,聚集在一起,而去除磁場后又能夠迅速恢復到分散狀態。用于核酸提取的磁珠表面具有特定的性質,在某些條件下能夠將病毒核酸吸附在表面,在另一些條件下又能將病毒核酸從表面釋放下來,用于后續的檢測步驟。寧波病毒核酸提取優點