用qPCR進行rcAAV復制型腺相關病毒檢測時，哪些因素會對檢測結果準確性和方法靈敏度存在較大影響？①qPCR引物探針的序列特異性：為保證方法高靈敏度和檢出率，用于qPCR檢測的特異序列必須是存在于高度保守區域內的穩定序列，并且需要散布在基因組上，保證不會因工藝導致的殘留偏好而引起漏檢。②qPCR實驗室能力驗證：為滿足檢測要求，應對實驗室硬件和軟件能力進行確認。實驗室設計應按實驗流程分區操作，每個操作區域配置相應設施、設備及耗材，建立實驗室質量管理體系，考核實驗人員的操作能力及數據分析解讀能力等。為什么要做復制型逆轉錄病毒檢測？杭州qPCR法病毒檢測常見問題

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的RCL基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、RCR基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、rcAAV-5/N檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）既適用于基于細胞培養法對復制型病毒的qPCR法的檢測，也適用于對無細胞基質的病毒收獲液（上清液）等樣品的復制型病毒檢測。試劑盒進行了多面的性能驗證，靈敏度高、特異性強、穩定性好、符合法規要求。南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的RCL基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、RCR基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、rcAAV-5/N檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）既適用于基于細胞培養法對復制型病毒的qPCR法的檢測，也適用于對無細胞基質的病毒收獲液（上清液）等樣品的復制型病毒檢測。試劑盒進行了多面的性能驗證，靈敏度高、特異性強、穩定性好、符合法規要求。復制型慢病毒檢測注意事項慢病毒檢測助力CAR-T細胞醫治產品質控放行。

CAR-T細胞的微生物安全風險可能涉及細菌、真   菌、支原體、外來病毒和來自載體生產的具有復制能力的病毒的污染。微生物安全問題需要高度關注，因為在生產過程中很容易發生微生物污染，而且蕞終的細胞產品無法凈化。CAR-T細胞的微生物安全主要通過對生產材料的嚴格檢測、按照CGMP要求嚴格控制生產過程、對產品進行微生物檢測來保證，檢測內容包括無菌檢測、支原體檢查、可復制型病毒檢測、微生物檢測。南京正揚生物目前可提供支原體快檢和可復制型病毒檢測相關產品。

盡管逆轉錄病毒和慢病毒載體被設計為具有復制缺陷，但仍有可能在生產過程中或輸注到患者體內后發生重組，從而產生新的具有復制能力的逆轉錄病毒/慢病毒（RCR/RCL）。FDA在有關細胞產品和患者中檢測RCR復制型逆轉錄病毒/RCL復制型慢病毒的指南中建議使用適當的生物學和/或分子檢測方法進行病毒載體、細胞產品和輸注后患者中的RCR復制型逆轉錄病毒/RCL復制型慢病毒檢測。南京正揚生物自主研發了可用于基于細胞培養方法的qPCR檢測以及CAR-T終產品qPCR檢測的RCL及RCR檢測專   用試劑盒，幫助研究者進行分析。為什么要做復制型慢病毒檢測？

基因治  療產品是近年來國內外藥物研發的熱點，通常由各種病毒或非病毒載體攜帶治  療基因組成。在病毒載體中，慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組、穩定的基因表達等特點，被認為是蕞有希望的基因治  療載體。考慮到慢病毒對人的病原性及相關的安全性，所使用的慢病毒載體均為復制缺陷型載體，但在病毒載體生產過程中可能由于同源重組或非同源重組導致可復制性慢病毒(RCL)的產生，RCL可以整合到細胞基因組中，從而導致原ai基因激   活，抑ai基因破壞等，因此，這類產品中的復制型慢病毒檢測是安全性檢測中非常重要的項目，美國FDA及中國CDE都要求在生產的整個過程及不同階段都要進行RCL檢測，以確保無RCL的污染。復制型慢病毒檢測的法規監管要求。泰州PCR法病毒檢測操作流程

南京正揚有復制型病毒檢測試劑盒試劑盒的裝量是多少？杭州qPCR法病毒檢測常見問題

復制型病毒/病毒載體回復突變（ReplicationCompetentVirus,RCV），可產生于病毒載體制造過程中的所有步驟當中。并且，RCV感   染宿主細胞后能隨宿主細胞在培養液中增殖、擴增對人體健康具有嚴重的隱患，是免疫細胞治     療類產品，如CAR-T產品的主要安全性風險之一。近年來，CAR-T細胞制備過程中，伴隨載體的不斷升級優化，重組產生的復制型逆轉錄病毒/慢病毒(ReplicationCompetentRetrovirus/Lentivirus,RCR/RCL)逐漸降低，但產生RCR/RCL的風險隱患至今仍不能完全排除。由2022年5月發布的《體外基因修飾系統藥學研究與評價技術指導原則（試行）》指出RCR/RCL檢測作為安全性檢測在細胞藥物的研發和生產過程中至關重要，相關產品不得檢出RCR/RCL，可知病毒載體相關產品中，RCR/RCL病毒檢測至關重要。杭州qPCR法病毒檢測常見問題