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上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

來源: 發布時間:2023-08-31

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

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保存條件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項:ClickAdditive配制成溶液后請注意適當分裝。如果溶解后有白色物質析出,請上下顛倒多次,待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色,說明該組分的有效成分已失效,請棄用。DAB對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。由于本產品需要銅離子催化進行點擊反應,請注意如下的兼容性問題及解決方案。本產品完全兼容有機類染料如Alexa Fluor®系列普通染料及fluorescein (FITC)、Allophycocyanin (APC)及APCE-tandems染提供EdU細胞增殖檢測試劑盒購買EdU細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。

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可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發光法)進行細胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優點是:實驗結果同增殖細胞數目緊密相關,可一步完成細胞的溫和固定和變性,操作方便穩定,不破壞細胞形態。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結合BrdU。

EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度EdU細胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。

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測定ATP水平檢測細胞增殖活細胞需要不斷以ATP的形式輸入自由能,因此通過檢測ATP的增加水平可檢測細胞增殖。ATPBioluminescenceAssayKitHSII及ATPBioluminescenceAssayKitCLSII是通過經典的熒光素酶發光對ATP檢測定量的試劑盒。前者主要應用于高靈敏度檢測極低濃度ATP的實驗,后者主要應用于當有持續信號產生而需要高重復性結果的實驗。DNA的合成的檢測:DNA的新組裝合成是細胞生長的必要條件,故經常被用來進行細胞增殖、細胞活力及凋亡的檢測。BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細胞的DNA中,可通過對BrdU及EdU的檢測,從而對DNA的合成量進行測定。上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。山東品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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EdU細胞增殖檢測試劑盒更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

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