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河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

來源: 發布時間:2023-12-08

    直接測定DNA合成是細胞增殖檢測的準確方法之一,的EdU細胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細胞增殖時EdU能夠插入正在復制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點擊化學(ClickChemistry)反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標記可以用于多色通道選擇。 EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發揮重要作用?河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。提供EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。

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這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。

EdU細胞增殖分析試劑采用click化學技術,可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統BrdU方法更的替代物。當在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學”反應檢測到它,并且對細胞的破壞作用小。點擊化學相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優點。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復用提高效力。當您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細胞增殖方面的優勢是顯而易見的。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

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上海東寰活細胞能將四咪唑鹽(如MTT、XTT、WST-1)還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽(Formazan),可通過分光光度計或酶標儀進行檢測。CellCountingKit–8(96992)和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細胞內脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養基中,生成的甲臜量與活細胞數量成正比?;贑CK-8(WST-8)的試劑盒能高度準確地檢測細胞增殖,比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍,能檢測更低的細胞數目。該試劑盒可適用于96孔板培養的貼壁或懸浮細胞。EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

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