午夜影皖_国产区视频在线观看_国产毛片aaa_欧美日韩精品一区_欧美不卡视频一区发布_亚洲一区中文字幕

EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發布時間:2024-01-26

細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發揮重要作用?EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

EdU細胞增殖檢測試劑盒原理,EdU細胞增殖檢測試劑盒

可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發光法)進行細胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優點是:實驗結果同增殖細胞數目緊密相關,可一步完成細胞的溫和固定和變性,操作方便穩定,不破壞細胞形態。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結合BrdU。湖北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理EdU細胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。

EdU細胞增殖檢測試劑盒原理,EdU細胞增殖檢測試劑盒

    搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應液組分500ul1ml2ml5mlIX反應緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液,以覆蓋細胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應液,加入300ulTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;(f)棄細胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗細胞兩次,去掉洗液。

直接測定DNA合成是細胞增殖檢測的準確方法之一,的EdU細胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細胞增殖時EdU能夠插入正在復制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點擊化學(ClickChemistry)反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標記可以用于多色通道選擇。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發揮的重要作用。

EdU細胞增殖檢測試劑盒原理,EdU細胞增殖檢測試劑盒

    避免反復凍融。如短時間內需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養板或培養皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板,HK2貼壁細胞為例)細胞培養取對數生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養至正常狀態。EU標記1、將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標記培養基;2、提前將2×EU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養基孵育細胞2小時,棄培養基。EdU細胞增殖檢測試劑盒多少錢?安徽哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒

EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

主站蜘蛛池模板: 久久av网 | 中文字幕亚洲精品在线观看 | 亚洲福利在线视频 | 精品动漫一区 | 亚洲精品久久久久久首妖 | 成人在线激情 | 精品国产一区二区三区四区在线 | 日韩精品一区二区三区在线播放 | 网站黄色在线免费观看 | 国产精品欧美一区二区 | 国产亚洲一区二区三区 | 久草精品视频 | 女人一区 | 中文在线一区二区 | 欧美精品一区二区三区四区五区 | 久久久国产精品网站 | 青青草一区二区三区 | 国产毛片视频 | 最新高清无码专区 | 欧美综合一区二区 | 欧美激情综合 | 亚洲一区二区三区免费视频 | 亚洲国产精品一区二区第一页 | 日本久久久久久 | 亚洲午夜电影 | 欧美精品欧美精品系列 | 国产日韩精品视频 | 精品综合视频 | 国产精品久久久久久中文字 | 成人免费黄色 | 欧美精品一级 | 精品久久久久久国产 | 综合色久| 亚洲综合视频一区 | 日韩av三区 | 日本欧美在线观看视频 | 91欧美精品成人综合在线观看 | 91九色porny首页最多播放 | 日韩精品999 | 久久久久久久久久久久亚洲 | 亚洲美女一区 |