EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。天津EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
alamarBlue®是一種快速、靈敏的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑,適用于人、動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌和等多種研究對(duì)象,可用于貼壁細(xì)胞和非貼壁細(xì)胞的檢測(cè)。作為一種無(wú)毒、即用型的試劑,alamarBlue®為細(xì)胞增殖分析提供了一種簡(jiǎn)便、快速、安全、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法。AlamarBlue®的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)●使用簡(jiǎn)單方便:即用型的單組分試劑,只需加入培養(yǎng)基即可檢測(cè)細(xì)胞的增殖狀況;產(chǎn)生的還原產(chǎn)物是水溶性的,與其他常用的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法相比,不需要固定、洗滌、提取的步驟●靈活:可通過(guò)分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)檢測(cè)●性?xún)r(jià)比高:可用于高通量分析●安全:對(duì)細(xì)胞無(wú)毒、無(wú)害,不影響細(xì)胞代謝、細(xì)胞因子分泌、抗體合成等,對(duì)人體和環(huán)境也無(wú)毒無(wú)害●高靈敏:比較低可檢測(cè)50個(gè)細(xì)胞河南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)?
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響,因此客戶(hù)了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí),然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。
該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)如今市場(chǎng)的影響。
搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測(cè)混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液,加入300ulTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;(f)棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗細(xì)胞兩次,去掉洗液。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用?湖北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)如何?天津EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類(lèi)似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。天津EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)