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云南高鹽核酸酶70921-150

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-04-17

在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下游純化過程中去除。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈,但實(shí)際生產(chǎn)中的核酸污染情況更加復(fù)雜。HCD通常以染色質(zhì)形式存在,與細(xì)胞裂解碎片、病毒顆粒等結(jié)合在一起,影響核酸酶的識(shí)別及剪切。因此,HCD去除的關(guān)鍵在于——核酸酶如何在復(fù)雜的生產(chǎn)體系中識(shí)別并剪切HCD。高鹽濃度下,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠更高效解離,從而更容易被降解。云南高鹽核酸酶70921-150

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跟其他類型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會(huì)可逆抑制兩者的活性,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補(bǔ)加過量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性。加熱、還原劑(如DTT)、咪唑、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100、SDS、尿素等)等都可以使其不可逆失活。在生物工藝流程,需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。山東ArcticZymes高鹽核酸酶70921致力于從深海微生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和制藥領(lǐng)域。

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基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時(shí)單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如,在生產(chǎn)、儲(chǔ)存和處理過程中,單克隆抗體也會(huì)受到低滴度、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn)。盡管與重組單克隆抗體相比,單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)可能更低(取決于雜質(zhì)的類型、劑量和給藥途徑),但這也不能忽視。由于這些相似性,制藥商、化學(xué)品和輔料供應(yīng)商有機(jī)會(huì)進(jìn)行合作,并開發(fā)創(chuàng)新的解決方案,以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健和成本效益高的AAV產(chǎn)品生產(chǎn)。

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領(lǐng)域提供了革新性、更高效的方案來解決大規(guī)模生產(chǎn)中核酸殘留問題。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負(fù)調(diào)控效應(yīng),行業(yè)在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,更多的是讓工藝選擇適應(yīng)酶。此后,行業(yè)可以根據(jù)工藝具體需求而選擇更合適的酶產(chǎn)品,既能達(dá)到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,真正實(shí)現(xiàn)讓酶適應(yīng)工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業(yè)提供更高效率的解決方案。SAN HQ高鹽核酸酶更適合用于AAV生產(chǎn)。

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ArcticZymes Technologies提供獨(dú)特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產(chǎn)品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA;都來自于深海microbes,通過Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM。鑒于生物制品藥物更嚴(yán)格的質(zhì)量要求,廠家對SAN HQ高鹽核酸酶的生產(chǎn)及質(zhì)控符合更高標(biāo)準(zhǔn)。廣東基因藥物生產(chǎn)用高鹽核酸酶70921

SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇。云南高鹽核酸酶70921-150

細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式,其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中,腺相關(guān)病毒(AAV)和慢病毒(Lentivirus)是常用的兩種載體;差別是病毒基因組的存在形式,AAV的基因組一般不整合到染色體中,以游離形式存在于染色體之外,且一般會(huì)表達(dá)數(shù)年之久;而慢病毒的基因組則會(huì)整合到染色體達(dá)到長期持續(xù)表達(dá)的目的。此外,其它用于基因藥物的病毒載體有單純皰疹病毒(HSV)、痘苗病毒(Vaccina Virus)、痘病毒(Poxviruses)。云南高鹽核酸酶70921-150

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