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安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

來源: 發布時間:2024-05-15

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,FabRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區域的突變敏感,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,FabULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。Genovis的FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達,分子量為 29 kDa,該酶含有 His 標簽。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

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Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動化使生物反應器的在線監測應用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設置的一部分,將反應器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量。山西GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶zhiliao性抗體和基于IgG的生物制藥的結構表征和監測關鍵質量屬性。

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與IdeS不同,為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質消化該蛋白質,該蛋白由與瓊脂糖珠共價偶聯的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯到樹脂上,可以增加酶與蛋白質的比率,從而可以進一步加速反應,以獲得更完整的連接子消化。此外,該酶不會存在于樣品制備中,可能會干擾樣品分析。為了進行比較,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜,或用GlySERIAS凍干1小時并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖,并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對樣品的分析表明,GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子,留下了接近均質的Fc/2產物,其中含有來自連接子的一個絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時或過夜消化,兩者都會產生幾種 Fc 產物,并附著不同數量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質Fc/2能夠詳細研究特定于Fc區域的質量屬性。此外,在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補充,Fc/2 產物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子,有助于研究位于 GS 連接子的修飾。

與IdeS不同,Genovis的IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性蛋白酶,可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM,產生均質的F(ab')2和Fc片段。該酶能夠對復雜和高分子量的人IgM進行中級分析,從而促進疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨特-可實現IgM的中級表征和質量控制;快速–在30分鐘內生成均勻的F(ab')2和Fc片段;高度特異性–人IgM重鏈中的一個消化位點。IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性酶,可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM,產生F(ab')2和Fc片段。消化在30分鐘內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值為5.5至9.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發揮活性。良好的活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為38kDa。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。

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在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質酶切產品。完整質量和肽圖譜是蛋白質表征的常用方法,我們發現,與簡單但信息有限的完整質量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優勢。通過執行中級描述,您可以生成從完整的質量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優勢。在對抗體進行完整質量分析時,很難明確地識別某些修飾。質譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠將它們定位到蛋白質上的單個結構域,這是你在完整水平上無法做到的。IgASAP酶是獨特的酶促工具,可實現 IgA 的中級表征和質量控制,用于疫苗診斷的開發過程。遼寧GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC(基于 IgG)消化成其亞基,用于表征這類復雜的藥物。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現額外的消化位點。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應,并鑒定翻譯后修飾。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

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