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來源: 發布時間:2025-06-27

文章作者對酶法去除dsDNA進行了優化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量。結果發現,25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優于100U/ml的Benzonase。此外,在酶切反應速度方面,M-SAN HQ有更明顯的優勢,——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內將dsDNA降解到2ng/ml左右;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右。相比傳統的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,對HCD的去除效率更高。福建中鹽核酸酶量大優惠

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倫敦大學學院(UCL)的工藝開發團隊,在細胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)生產過程中,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時間、各階段LV的穩定性等方面的表現,發現在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時間更短,同時用納米顆粒分析(NTA)技術確認M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩定性更高。他們會繼續探究HCD是否影響LV的穩定性,及對LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究,我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產的關鍵機制。吉林效果中鹽核酸酶價格表常州中鹽核酸酶產品質量哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。

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經典的慢病毒載體(LV)的生產工藝如下,——三質粒系統瞬時轉染HEK293細胞系,轉染24小時后LV由轉染陽性細胞生產并排出到培養上清液中;收獲上清培養液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過澄清步驟去除大的細胞碎片等雜質;下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心;純化后的LV病毒顆粒經過無菌過濾,更換到優化后的配方中,灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產時取對應量的LV病毒,切忌反復凍融,否則LV病毒會失活。

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領域提供了革新性、更高效的方案來解決大規模生產中核酸殘留問題。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負調控效應,行業在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,更多的是讓工藝選擇適應酶。此后,行業可以根據工藝具體需求而選擇更合適的酶產品,既能達到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,真正實現讓酶適應工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業提供更高效率的解決方案。安徽中鹽核酸酶哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。

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Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,MV)為例,評估了四種不同核酸酶(BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶)對于染色質DNA去除的效果。Vero細胞通過微載體貼壁培養來生產麻疹病毒MV,72h后收獲上清液,使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,置于-80℃保存便于后續使用。在解凍后的上清中調節對應鹽濃度,并加入50 U/ml核酸酶,37℃孵育2hr進行消化,消化后留樣;將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,收集流穿液,之后洗雜、洗脫,并分別留樣。通過SDS-PAGE分析發現,相比Benzonase等傳統核酸酶,在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質DNA剪切成更小片段,甚至將核小體DNA剪切更徹底。上海中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。云南國內中鹽核酸酶價格表

M-SAN HQ ELISA kit具有高精確度及高準確度。福建中鹽核酸酶量大優惠

核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此,不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前,生物制藥行業對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調整,同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA(HCD)的去除效果更好、病毒載體得率更高。經過工藝優化后,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,且HCD去除效果及產品得率更高。福建中鹽核酸酶量大優惠

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